用生物标志物探讨典型区域水污染的致突变量.pdfVIP

第五部分 生态、生物和遥感监测 用生物标志物探讨典型区域水污染的致突变量 厉以强 江苏省环境监测中心南京210036 摘要针对水源污染的风险评价问题，本文用生物标志物检测水源污染的致突变量，作为评估水中有毒有害 污染物潜在遗传危害的综合指标，并对测试和评估方法进行了研究和探讨。 关键词 生物标志物水污染致突变 水是人类不可缺少的重要物质，也是不可替代的重要自然资源。水资源状况如何，不 仅与人民生活和健康直接相关，而且关系到工农业生产和整个国民经济社会的可持续发 展。然而，由于众多的化学污染物质通过人类生产、生活废水的排放进入环境，污染了水资 源，威胁人们的饮水安全，危害人体健康和社会稳定，由此产生的环境安全问题及其对策研 究已成为国内外极为重视的课题。 水源安全问题已引起中央领导高度重视。胡锦涛总书记在人口、资源环境工作座谈会 上指出“一定要把切实保护好饮用水源，让群众喝上放心水作为首要任务”。吴邦国委员长 要求“把群众关心的水安全问题作为重点工作认真抓好”。温家宝总理强调“要抓紧解决严 重影响人民群众健康安全的环境污染问题，以水污染防治为重点”、“加强饮用水源地保 护”。 我省地处长江下游地区，癌症发病率和死亡率居全国前列…，地表水体承受着本省污 染源和上游外来污染物的双重危害，水质污染状况令人忧虑。我省城市居民主要以地表水 作为饮水水源的现状，使得这一问题变得更加突出，成为制约我省经济可持续发展的关键 因素之一，已引起有关部门的高度重视。 然而，如何评价水源是否安全?我国最新版本的《地表水环境质量标准》(GB3838— 2002)虽然增加了集中式生活饮用水地表水源地80项特定项目的标准限值，但仍然沿用常 规理化指标，不能反映环境污染对人体健康的综合影响，因而难以说清水源是否安全。本 文尝试用DNA损伤作为生物标志物，检测水中有机浓集物的致突变性大小，即致突变量 TotalEffectof (the Mutagenesis，TEM)，探讨从“三致”毒性角度评估水污染风险的新方法。 所谓致突变量，是指某受试生物细胞因受多种环境污染物的共同作用，在DNA分子水平上 产生的遗传毒效应的总和，是检测环境中污染物“三致”效应的综合性指标。 l材料和方法 1．1试验生物材料 健康人外周肝素抗凝全血，测试当日取自南京红十字血液中心采血车。 1．2采样点布设、水样采集与预处理 选择我省长江TZ段为典型区域，在主干断面设3个采样点，上游TX市饮用水源地设 1个采样点，TX污水处理厂与JJ市纳污河九圩港入长江排口各设1个采样点。 第五部舟生态、生物和遥感监剥 2005年1月于上述点位采样，长江主干断面和水源地采水20L，污染源采水4L。静置 24hr，过滤去除悬浮颗粒，通过XAD一2树脂l吸附柱富集，控制流速在30—40roT／rain，N2排 除水分．以甲醇、阿酮、二氯甲烷洗脱．洗脱液用氯畋仪在50℃条件下浓缩，吹干，再用一甲 OmL，避光保存丁一18℃冰箱中备用。 基亚砜(DMSO)溶解，定容至4 1 3测试、评价方法 接常规分离人外J爿血淋巴细胞．采用昔譬试验作为牛物标志物测试系统。试验原理 为：包埋在琼脂糖凝胶中的细胞在中性或碱忖!条件F经裂解与解旋后．带负电荷的DNA游 离断片，在电场作用下向阳极迁移。在荧光显微下观察．受损DNA形成类似啮罐的影像 随着损伤的增加，彗星尾都也随之伸展。试验流程为：受试物处理细胞一铺细胞于凝胶一 裂解细胞一电泳_EB染色_．镜检。试验方法参照Singh等[21的报道，典型彗星罔像见H I、图2。 圄1对照组人外周淋B彗￡图像(x400)目2某剂■组人蚪周淋B彗g图像(×枷 测试预设系列的阳性致突变物对人外周血淋巴细胞的DNA损伤。以c『(Ⅵ)为标准阳 性致突J竖物，接5倍递增的等对数方式设7个剂量组和1个对照组，每组至少5个平行，每 个平行在荧光显微镜下至少拍摄20个以上彗星图像。采用彗星图像分析软件CASP分析 Or(VI)与人外周血淋巴细胞DNA损伤的剂量一被应关系．作为标准曲线。 将上述水样有机浓集物按I：5倍方式分别稀释至适、j浓度，进行预试验．选择合适的 剂量组测试其对人卅周血淋巴细胞的DNA损伤，以各样晶Olive尾矩代人