268例慢性乙肝患者拉米夫定治疗不同时间耐药突变株变化分析.pdfVIP

中国卫生检验杂志20o8年 11月第 l8卷 第 11期 ChineseJoum~0fHealt}lI 0ral0ryrechn0l0gy，Nov2008；Vdl8 N0l1 【临床检验】 268例慢性乙肝患者拉米夫定治疗不同时问耐药突变株变化分析 张静 ，徐维家 ，王钢 (1．辽宁省大连市中心医院，辽宁大连 11~23；2．辽宁省大连市友谊医院，辽宁大连 l160o1) [摘要] 目的：检测慢性乙肝患者在拉米夫定治疗过程中耐药突变株变化。方法：采用实时荧光PCR方法对接受拉米 夫定治疗不同时间的患者进行YMDD耐药突变检测，及血清HBVDNA水平检测，分析耐药突变发生的时间节点。结果： 通过检测拉米夫定治疗不同阶段血清 HBVDNA水平和 YMDD变异情况，发现在 170例HBVDNA阳性的患者中有 117 例发生YMDD变异，变异率为69％。根据治疗时间进行分组 ，治疗时间小于6个月的患者 YMDD变异率为 13％，治疗时 间超过24个月的患者全部出现YMDD变异(P0．05)。结论：对接受拉米夫定治疗的患者从第6～7个月开始检测YM— DD变异 ，可以尽早发现耐药变异，为临床治疗方案的选择提供依据。 [关键词] HBV；YMDD；变异；检测 [中图分类号] R373 [文献标识码】 B [文章编号] 1004—8685(2008)11—2343—02 慢性乙型肝炎的治疗近几年取得了长足进展。迄今为 或V)ct值的差异计算出突变株在病毒群体中的相对比例，计 止，我国已经批准多种药物用于慢性乙肝的抗病毒治疗，如干 算公式为：①ACt=Ct对照一ct变异，②变异率=2 。‘扩增 扰素、拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦、替比夫定和PEG干扰 和检测在ABI750o荧光 PCR系统上完成。 素。拉米夫定是最早批准用于慢性乙肝康病毒治疗的核苷类 1．4 统计学处理 似物，由于其抑制病毒复制效果显著，耐受性好，副作用小，因 采用U检验进行组间比较。 而在临床上的应用十分普遍 ，是治疗慢性乙肝 的首选药物之 一 。 但长期使用拉米夫定单一治疗容易出现耐药突变。虽然 2 结果与分析 有很多方法可以检测拉米夫定耐药突变，但什么时候进行检 2．1 血清HBVDNA定量测定 测能够尽早发现耐药突变而又不增加患者负担，是临床抗病 治疗前268例患者血清HBVDNA水平的对数值为7．58 毒治疗中的重要问题。 ±1．32(6．05～8．56)，接受拉米夫定治疗后有98例患者 HBV DNA转阴，另有 170例患者 HBVDNA阳性。将患者根据治疗 1 对象与方法 时间分组，可以看出随着拉米夫定治疗时间的延长，HBVDNA 1．1 对象 阴性比例逐渐降低，而HBVDNA阳性比例逐渐上升，这说明 我院门诊和住院慢性乙肝患者268例，其中男性 198例， 随着治疗时间的延长 ，由于耐药突变发生率提高，导致发生耐 女性70例，年龄15～60岁，均已接受拉米夫定治疗 1～4o个 药的患者HBVDNA反弹，从而使 HBVDNA阳性患者比例上 月。所有患者治疗前HBsAg阳性6个月以上，HBVDNA大于 升(见表 1，图1)。 1O拷贝／rnl，ALT大于2倍正常值高限(uLN)。所有患者均 未发现其他肝炎病毒或HW合并感染。 表1 拉米夫定治疗时间与船 VDNA阳性率 1．2 试剂与仪器 1．2．1 试剂