对羟基肉桂酸对酪氨酸酶催化反应的抑制机理.pdfVIP

现代食品科技 ModernFoodScienceandTechnology 2015，Vo1．31，No．2 对羟基肉桂酸对酪氨酸酶催化反应的gp$1]机理 孙晓梅’，穆燕 ，李琳’，胡松青 ’ (1．华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640)(2．深圳职业技术学院，广东深圳 518055) 摘要：本文研究了对羟基肉桂酸 (HCA)对酪氨酸酶催化单酚底物L一酪氨酸和催化二酚底物L．多巴的抑制能力，并利用紫外一可 见光谱、荧光光谱以及分子对接技术探究了其抑制机理。结果表明对羟基肉桂酸对酪氨酸酶催化单酚底物 L．酪氨酸比催化二酚底物 L一多巴具有更强的抑制作用’半抑制浓度分别为O．096mmol／L和0．500mmol／L；紫外．可见分析发现对羟基肉桂酸能与Cu2+~生螯合， 使光谱发生明显红移。进一步通过荧光光谱分析得到，对羟基肉桂酸在酪氨酸酶溶液中并没有出现荧光淬灭反而随着对羟基 肉桂酸浓 度的增大荧光强度变强，说明对羟基肉桂酸被酪氨酸酶催化氧化成对应的醌类物质。利用分子对接技术揭示了对羟基肉桂酸通过氢键 和疏水作用竞争性地占据了单酚和二酚底物的空间位置，并与酪氨酸酶中双核铜离子螯合 ，从而抑制酪氨酸酶催化L一酪氨酸和L-多巴 氧化的活性机理。 关键词：酪氨酸酶；对羟基肉桂酸；抑制机理；分子对接 文章篇号：1673—9078(2015)2—76—80 DOI：10．13982j／．mfst．1673—9078．2015．2．014 InhibitionM echanism of4--HydroxycinnamicAcidonReactionsCatalyzed byTvrosinase SUN Xiao．rnei，M UYan，LILin，HU Song-qing f1．CollegeofLightIndustryandFoodSciences，SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510640，China) (2．ShenzhenPolytechnic，Shenzhen518055，China) Abstract：Thepurposeofthisstudywastoinvestigatetheinhibitioneffectof4-hydroxycinnamicacid(HCA)onhtecatalyticactivityof tyrosinaseonthemonophenolsubstrateL-tyrosnieanddiphenolsubstrateL—dopa．Themechanism ofinhibitionwasstudiedusnigUV-vis spectroscopy,fluorescencespectroscopy,na dmoleculardocking．TheresultsshowedhtatHCA Was moreeffectiveatinhibitinghtecatalytic activiyt oftyrosinaseonthediphenolsubstrateL-tyrosinehtanonhtemonophenolsubstrateL-dopa；theirIC50valueswere0．096nad0．500 mmol／L，respectively．TheUV-visiblespectrum showedaredshiftnihtecharacteristicabsorptionpeal【ofHCA becauseofhteformationofa Cu chelatecomplex．Furthermore，fluorescencequenchingofHCAnityrosniasesolutiondidnotoccurnadinstead,htefluorescenceintensiyt increasedwiht nicreasingHCA concenrtation，indicatingthatHCA Was caatlyticallyoxidizedtohtecorresp