色氨酸的修饰与分析研究.pdfVIP

色氨酸的修饰和分析研究 保志娟，马会民紊 (中国科学院化学研究所，北京100080) 摘要：色氨酸不仅是人体必需的氨基酸，而且是构成蛋白质的重要组分之 一。色氨酸在动物、植物的生长与调节等方面具有重要的作用。蛋白质中色氨 酸残基的反应以及色氨酸的代谢紊乱均会引发与之相关的各种疾病。另一方 面，色氨酸也可以作为疾病的治疗药物。因此，色氨酸的检测及修饰研究不仅 具有科学意义，而且在医学和生物工程领域中具有重大的应用价值。目前，已 有多种测定色氨酸的方法，但简单、可靠、直接鉴定混合氨基酸中色氨酸的方 法却仍然缺乏。此外，现有的色氨酸残基的修饰方法其选择性也不够高，故需 要发展新的、专属性的标记方法，以准确获取蛋白质的局部结构信息。我们以 此为课题开展了相关研究，发展了一种高选择性的色氨酸显色鉴定新方法：设 计合成了新的重氮姜黄素类荧光探针，并将其成功地用于p乳球蛋白中色氨酸 残基的修饰研究u，2J。 一 主要内容包括以下两个方面： 分解并形成活性卡宾铑中间体，继而选择性与色 1．研究发现，色氨酸在HCOOH．HCl的混合水氨酸残基发生偶联反应。利用这种金属催化的卡 溶液中，可发生高度选择性的紫蓝色反应，而其 宾插入反应，将BDHD标记到B-乳球蛋白的T,p]9 它常见的氨基酸则无此显色现象。据此，建立了 残基上，并对修饰后的蛋白的性质进行了研究。 一种可用于混合氨基酸样品中色氨酸的目视鉴定 结果发现，这种修饰仅引起了蛋白质二级结构的 新方法，并可用于肽片段、甚至蛋白质中色氨酸 稍微改变，但可导致其三级结构发生较大的变化， 残基的存在与否的确证。通过对色氨酸的模型化 并可对8一苯胺基．1．萘基磺酸和视黄醇的结合行为 合物如吲哚和吲哚．3．丙酸的比较研究，系统探索 产生较大的影响。这说明Trpl9对p乳球蛋白的结 了该显色反应的机理。结果表明，吲哚骨架是反 构和稳定性起着重要的作用，其选择性修饰可以 应的必需单元，吲哚环上的3，位取代基决定着反 用来研究蛋白的结构与功能的关系。 应的速率和颜色，且1．甲酰基色氨酸衍生物可能 对颜色有贡献。 参考文献 Shuna，LIJurad Int 2．设计并合成了对环境极性敏感的新荧光探 [1]BAOZhijuan，SUN a／．AI铡Chem 针1，7．双(4_羟基．3．甲氧基苯基)4重氮．1，昏庚二Ed，2006，45：6723 BAO Wen nDt舳 [2] Zhijuan，WANGShujuan，Sillet越．J 烯．3，5．二酮(BDHI))，并对其光谱性质进行了研 究。该探针由重氮标记基团和姜黄素荧光母体组 Res，inpress 成。重氮基能被过渡金属化合物飚(OAc)。催化 Researchesonthemodificationand of analysistryptopimn BAO MA of and Hui-min’(Instituteof 100080) Z珏juan Chemistry，ChineseAcademy Sciences，Beijing