鸭圆环病毒核酸探针制备与应用.pdfVIP

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集 树分析显示，除台湾株外，主要是和我国北方Jx、 北方毒株发生碱基突变而来；与以上各毒株亲缘关 系较近，变异不大，应用该毒株的VP3基因研究新 DO、HBZF07处于同一分支，另外一分支主要是我国 南方的毒株及匈牙利强毒株B株。根据该毒株采 型疫苗是可行的。 集的区域及进化树分析显示：该毒株可能是由我国 鸭圆环病毒核酸探针的制备与应用 邹金峰1一，刘少宁1一，雷战1一，孙慧1一，魏宗1一，王鑫1一，姜世金1，2。 (1．山东农业大学动物医学院。山东泰安271018；2．山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室，山东泰安271018) 鸭圆环病毒(Duckcimovims，DuCV)于2003年由Roche公司。含有DuCV全基因组序列的质粒 Hattermann在德国首次发现，目前已分别在匈牙利、 pDuCV由本实验室制备并保存，将其大量扩增后线 美国、中国台湾及中国大陆等地被发现或报道。 性化并按常规方法标记核酸探针，对该核酸探针进 DuCV在临床上可使病鸭表现为发育不良、体重下降行了特异性及敏感性检测，并对临床病料进行了斑 及羽毛凌乱等，病理学分析认为，DuCV感染侵害鸭点杂交检测。 的免疫组织，表现为淋巴细胞萎缩、坏死等，这样增 2结果与分析 加了其它细菌或病毒继发感染的可能性拉J。DuCV 用标记好的探针对鸭圆环病毒、鸭病毒性肝炎 与鸭疫里默氏杆菌、鸭病毒性肝炎I型病毒、鸭大肠 I型病毒、鸭瘟病毒的核酸片段进行检测。结果显 示该探针只于鸭圆环病毒的核酸片段杂交呈阳性， 杆菌等病原微生物的混合感染率较高【7J，常常给养 鸭业带来巨大的经济损失。 而与鸭病毒性肝炎I型病毒、鸭瘟病毒的核酸杂交 呈阴性，说明该探针具有良好的特异性。核酸探针 目前对DuCV病原的研究主要集中在PCR检测 敏感性试验结果表明制备的探针对DuCV的最小检 及全基因组序列测定分析两个方面，最近检测I)uCV 测量为5pg。 抗体的ELISA检测方法得以建立与应用，为进行 应用制备得探针对从山东、江苏、四川I等地采集 DuCV的血清学调查提供了便利。PCR检测病原虽 的196只鸭病料，共980份脏器的组织DNA进行检 然具有灵敏度高的优点，但同时存在易呈现假阳性 测，结果138份组织样品为阳性，组织检出率为 和假阴性的缺点。核酸探针杂交检测兼有灵敏度 14．1％，65只鸭子DuCV感染为阳性，个体检出率为 高、特异性高、稳定性和可靠性好的优点，近年来在 33．2％，不同地区均检出DuCV，其个体检出率在 病原微生物感染的检测中得到了广泛应用。本研究 8．5％一82．8％。对上述组织进行PCR检测，其中 制备了DuCV的特异性核酸探针，并应用该探针对 105只鸭子检出阳性，阳性检出率为53．6％，两者的 临床病料进行了检测。 符合率是87．5％。 1材料和方法 取65只DuCV检出阳性的鸭子分别统计脾脏、 从山东、江苏和四川三个省份共6个地区的鸭