谷氨酸对人骨髓间充质干细胞中Par-4蛋白表达的影响.pdfVIP

第23卷第21期 2008年l1月 JApplClinPediatr，VoL23No．21，Nov．2008 · 1689 · · 论著 · 谷氨酸对人骨髓间充质干细胞中Par．4蛋白表达的影响 凌 岚，陆 超，陈吉庆，周国平，吴升华，管亚飞，袁传顺 (江苏省妇幼卫生保健中心 南京医科大学第一附属医院 儿科，南京210029) 摘要：目的 探讨谷氨酸对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)中Par-4蛋白表达的影响及意义。方法 用 BMSCs分离液和密度梯 度离心分离和培养人BMSCs，取第3～5代培养的细胞，分别加入小鼠抗人CD 一FITC、CD 一FITC、CD，一FITC、CD 一FITC、CD14-FITC、 CD ．FITC单克隆抗体 ，流式细胞术鉴定其免疫表型。采用0．1nmol／L、1．0nmol／L、10．0nmol／L等不同剂量谷氨酸处理人 BMSCs 24h，并设正常对照组。Westernblot测定各组Par-4与突触素 1(Synapsin一1)的蛋白表达量 ，并进行2种蛋白表达的相关性分析。结 果 在显微镜下，BMSCs呈星形或梭形。流式细胞术鉴定发现培养的细胞 中CD 、CD 、CD 表达阳性，而 CD 、CD CD，表达阴 性，符合 BMSCs特点。正常对照组Par-4蛋白相对表达量为l7．434-5．9，0．1nmol／L、1．0nmol／L、10．0nmol／L谷氨酸诱导人BMSCs 中Par-4蛋白表达依次升高，分别为39．33-48．2、49．45-4l1．5、86．41-414．9(P 0．01)。谷氨酸处理导致 BMSCs中Synapsin一1表达 下调，并呈剂量依赖性(F=49．1 P0．01)。10．0nmo~L谷氨酸处理24h后 ，Par-4蛋白的表达与Synapsin-1的表达量呈显著负相 关(r=一0．643 P0．01)。结论 谷氨酸诱导人BMSCs中Par-4表达升高，并可能使植入到缺血微环境中的BMSCs发挥神经细 胞替代的作用受到负面影响。 实用儿科临床杂志．2008。23(21)：1689—1690 关键词 ：谷氨酸；人骨髓问充质干细胞 ；Par-4 中图分类号 ：R722．1 文献标志码 ：A 文章编号：1003—515X(2008)21—1689—02 EffectsofGlutamateonExpressionofPar一4Protein inHumanBoneM esenchymalStem Cells LINGLan，LUChao，CHENJi—qing，ZHOUGuo—ping，WUS 一hua，GUAN Ya一 YUAN Chuan—shun ， ． (DepartmentofPediatrics，WomenandChildrenHeahh—CareCenterofJiangsuProvince，theFirstAffiliatedHospitalofNanjingMedicalU— niversity，Nanjing210029，JiangsuProvince，China) Abstract：Objective ToinvestigatetheeffectsandsignificanceofglutamateonexpressionofPar一4proteininhumanbonemesenchy— realstemcells(BMSCs)．Methods HumanBMSCswereincubatedandweredividedintonormalgroup．