鼻息肉中IL-15的表达及其作用的初步研究.pdfVIP

3．4 BMN对鼻粘膜嗜酸细胞的干预作用。韩德民等报导在体外鼻息肉组织中用TUNEL染色未发现 细胞凋亡情况，但是糖皮质激素刺激后出现明显凋亡，因此又证实嗜酸细胞数量增高与细胞凋亡减慢 有关。本实验提示中药在干预同腺体、血管及基底的凋亡指数的同时，有效的调节嗜酸细胞数量，也 进一步证实中药双重调节，维持膜稳态的作用机制。 L-I 鼻息肉中I 5的表达及其作用的初步研究 王挥戈 秦杰升 林心强 沈志忠 洪良利 林彬 汕头大学医学院第一附属医院耳鼻咽喉一头颈外科(汕头515041) 汕头大学医学院病理教研室(汕头515041) 具有与IL一2类似的生物活性，在炎症反应中起着重要的作用，其中一个重要的效应是对嗜酸性粒细胞、 淋巴细胞、肥大细胞等多种炎性细胞有着募集及抑制其凋亡的作用。并且，进一步的研究表明IL一15 对炎症细胞的凋亡抑制可能足通过Bcl-2和Bcl—XL两种凋亡抑制基因产物的表达增多实现的。 息肉发病的关键，组织中炎症细胞的浸润程度取决于组织对其募集及在组织中的清除速度。因此，我 们推测IL—15介导的鼻息肉中炎症细胞特别是EOS的凋亡抑制在鼻息肉的发病中可能起着重要的作用。 达情况，并且以下鼻甲粘膜作为对照。研究IL一15介导的炎症细胞凋亡抑制在鼻息肉发病机制中的作 用。 1．材料与方法 1．1标本采集 鼻息肉组织来源于我科行鼻息肉手术患者共24例，其中男性11例，女性13例。下鼻甲来源于同 期我科行鼻中隔矫正术中切除之下鼻甲，共8例，其中男性5例，女性3例。以上各例标本均分为两 份，其中一份用4％多聚甲醛固定，备免疫组化用；另一份用灭菌后的EP管装好后置于一80C冰箱保存， 备ELISA检测用。以上患者实验前2周内无全身或局部使用糖皮质激素、免疫抑制剂及任何种类鼻喷 剂。鼻息肉标本均常规行HE染色，确诊为鼻息肉。 1．2主要试剂 及Bcl—XL单克隆抗体由武汉博士德公司提供。二抗为北京中杉金桥公司提供的两步法检测试剂盒。DAB 显色剂同样由北京中杉金桥公司提供。 1．3实验方法 1．3．1ELISA标本洗净血水后用滤纸吸干，切割称重后置匀浆器中剪碎，按每lmg组织加入2pl lI 配制标准品后将标准品及上清液各1001加入微孔板中，按ELISA试剂盒说明操作。最后用酶标仪于 450nm测定0D值，用标准曲线求出IL—15浓度。 1．3．2免疫组化固定好的标本常规石蜡包埋，切片。脱蜡至水，3％双氧水封闭内源性过氧化物 抗，37℃孵育后用DAB显色，苏木素复染后脱水透明，中性树脂封片。检测中以PBS代替一抗作为阴 性对照。 结果判定方法：选择5个高倍(×400)视野，以细胞浆中出现土黄色或黄褐色颗粒者判为阳性， 合并计算所分析的5个不同视野染色细胞百分数及染色强度，根据阳性细胞的百分率及显色深浅分级： 65％细胞显色者为2级；65％细胞显色者为3级。②显色深浅：不显色或显色不清楚为0级；土黄色 者为1级；棕黄色者为2级；深褐色者为3级。将两种评分相加除以2即为该切片的最终评分。将O、 0．5～1、1．5～3分，分别定为阴性(一)、阳性(+)、强阳性(++)。 1．4统计学方法 实验结果均采用SPSSIO．0软件进行统计学分析。计数资料采用两独立样本T检验；等级资料采用 2．结果 2．1 ELISA结果 附图。(见下页) 口下鼻甲组 一鼻息肉组 0 200 400 600 800 1000 pg／ml 附图1：鼻息肉及下鼻甲中IL一15表达情况图 2．2免疫组化结果 鼻息肉中Bcl-2表达主要位于上皮中，另外在组织内炎症细胞中有细胞散在表达。下鼻甲上皮中 亦有Bcl一2表达，部分于组织内有散在炎症细胞表达。其差别无统计学意义。鼻息肉及鼻甲中Bcl—XL