细菌蓝紫色色素的生产及特性研究.pdfVIP

细菌蓝紫色色素的生产及特性研究 卢元，薛园，王立言，娄恺，邢新会‘ ‘通讯作者，教授，博士生导师，北京清华大学化学工程系生物化工研究所．电话：010 色素可以用作染料、颜料、食品添加剂等，被广泛的应用在纺织、建筑、食品、 生物、医药卫生、化妆品、日用工业品、饲料等行业领域。色素可以分为两类： 人工合成色素和天然色素。人工合成色素是指用人工化学合成方法所制得的有机 色素，主要是从煤焦油中提取或以苯、甲苯、萘、苯胺等芳烃类化合物为原料合 成，又称煤焦油色素。特别是在食品、医药和化妆品等行业，因为人工合成色素 的安全性和在环境中的残留性问题，比如苏丹红事件等，使天然色素在世界范围 内受到广泛的关注，并且天然色素社会可接受性极强。天然色素主要来源于矿石、 植物、动物和微生物。相比较而言，由于微生物生长快、培养容易，容易工业化， 因此利用微生物生产天然色素的技术具有广阔的应用前景。自然界中生产红曲色 素¨，类胡萝卜素2)等红色、黄色天然色素品系的菌种存在较多，但蓝色作为基本 色调之一，生产蓝色色素的菌种却非常稀有，仅有的是天蓝色链霉菌A3(2)生产放 线菌紫素引，詹森杆菌属生产紫色杆菌素4-5),而且，我国目前关于微生物生产蓝 色品系色素的研究罕有报道。因此，研究建立蓝色色素的微生物生产工艺具有重 要研究价值。 本研究从新疆冰川样品中，筛选了一株能高效生产蓝紫色色素的细菌B1，该 菌表现出和Janthinobacterium 在固体培养基中菌落上显紫色，经提取得到的色素粗提物在溶剂中呈现蓝色或蓝 紫色。该色素可以很好的溶于甲醇、乙醇和四氢呋喃，难溶于水和石油醚。利用 高压液相色谱将粗提到的色素进行分离纯化，得到两个组分。纯化得到的色素再 次通过高压液相色谱一质谱联用和核磁共振谱图进行分析，并与标准品”进行对比 确定色素为紫色杆菌素和脱氧紫色杆菌素。 ¨ ¨ ¨ ¨ ¨ 一-l，6一c兽eIu-ocou ” lu。E口ld ¨ ¨ OOO5 1 O52O 25 5．0 55●O4,55．0 5．5 0tl05 7．075 cuIl‘lmTn(d) 图1细胞在10。C，15C，20*C，25C，30。C不同温度下色素生产情况 培养温度和培养基组分是影响细胞生产色素的关键因素。将细胞分别置于 10 40。C涠a度下，200 4C，15C，20。C，25C，30c矛n rpm转速下培养。在40*C细胞不 生长，其他温度下细胞都有所生长，色素产生情况见图1。高于25C，细胞生长 9C下培养的细胞所产色素浓度最高。改变培养基 但不产色素；培养7天后，在15 134 碳源、氮源、无机盐和维生素组分种类，一些组分对细胞色素生产都有较大程度 的促进或者抑制作用。该菌生产色素对碳源和氮源有一定的依赖性。经培养条件 优化，该菌色素最高产量可达到0．8019色素粗提物／g细胞，比文献4报道的产蓝 紫色色素微生物的最高产量O．1889色素粗提物／g细胞高的多。 Akira Shirata等人已可将紫色杆菌素在聚酯、生丝、聚丙烯纤维、尼龙、维尼 纶等9种不同的纤维布料上成功染色。但是，对于天然色素一个重要的问题是在 太阳光下易降解，文献中用硫脲重复处理多次后，可成功解决天然色素的不稳定 性问题。在一些医学研究中，发现该色素有明显的抗生素、抗肿瘤、抗自血病和 抗克鲁斯