褚实子活性成分提取计划书.docVIP

褚实子活性成分提取计划书 通过大量文献调查，笔者发现褚实子中含量较多的成分为褚实子油及氨基酸成分，为了有效集中的研究褚实子中的活性成分，本实验主要选择提取褚实子油及褚实子中氨基酸两类物质，其提取计划如下： 褚实子油的提取工艺 本实验中提取褚实子油采用索氏提取法，以石油醚为主要溶剂，影响褚实子出油率的主要因素为：提取温度、提取时间、提取次数和料液比，因此，实验可以分别以提取温（每10℃为一个梯度）、提取时间（每1小时为一个梯度）、提取次数（每一次为一个梯度）、 料液比等来设置梯度，测定最终产率，确定最佳实验条件，以便进行以后的实验。 （1）提取温度的影响 提取温度（℃） 提取时间（h） 提取次数（次） 料液比（g／ml） 40 4 1 1：4 50 4 1 1：4 60 4 1 1：4 70 4 1 1：4 80 4 1 1：4 1.称取等质量的干燥褚实子五份，碾碎过筛，用纸包好，编号①、②、③、④、⑤，按料液比1：4加入溶剂，用索氏提取器分别在温度为40℃、50℃、60℃、70℃、80℃的水浴中进行提取，连续提取4小时，趁热抽滤，收集滤液.减压蒸馏，回收石油醚。105℃干燥一段时间后，称量，分别计算出油率，作出温度—出油率曲线，比较得出适宜温度。 （2）提取时间的影响 提取温度（℃） 提取时间（h） 提取次数（次） 料液比（g／ml） 60 4 1 1：4 60 5 1 1：4 60 6 1 1：4 60 7 1 1：4 60 8 1 1：4 2.称取等质量的干燥褚实子五份，碾细过筛，用滤纸包好，编号①、②、③、④、⑤，按料液比1：4加入溶剂，在恒温水浴60℃下用索氏提取器分别提取4h、5h、6h、7h、8h，趁热抽滤，收集滤液，减压蒸馏，回收石油醚。105℃干燥适宜时间，取出分别称重，计算出油率，作出提取时间—出油率曲线，比较得出适宜提取时间。 （3）料液比的影响 提取温度（℃） 提取时间（h） 提取次数（次） 料液比（g／ml） 60 4 1 1：2 60 4 1 1：4 60 4 1 1：6 60 4 1 1：8 60 4 1 1：10 3.称取等质量的干燥褚实子五份，碾细过筛，用滤纸包好，编号①、②、③、④、⑤，在60℃℃恒温水浴下，置于索氏提取器中，分别以料液比1：2、1：4、1：6、1：8、1：10，连续提取4h，趁热抽滤，滤液置于旋转蒸发仪上减压蒸馏，回收石油醚，然后将粗品置于105℃烘箱中干燥，一段时间后取出，称量，计算出油率，作出料液比—出油率曲线，分析料液比影响，得出适宜料液比。 （4）提取次数的影响 提取温度（℃） 提取时间（h） 提取次数（次） 料液比（g／ml） 60 4 1 1：4 60 4 2 1：4 60 4 3 1：4 4.称取等量干燥褚实子五份，碾细过筛，用滤纸包好，编号①、②、③、④、⑤，在60℃恒温水浴下，置于索氏提取器中，分别提取1、2、3次，每次提取4h。分别将所得混合物趁热抽滤，收集滤液，减压回收石油醚。然后将粗品置于105℃下干燥一段时间，取出称重，计算出油率，作出提取次数—出油率曲线，综合分析，比较得出最佳提取次数。 综合以上各项试验的结果，用spss软件系统处理实验数据，得出最佳提取参数，以便进行其后的工作。在得出的提取参数条件下提取褚实子油，滤过,收集滤液，减压回收石油醚后，干燥，得褚实子油粗品。 楮实子氨基酸成分的提取 本实验中采用溶剂提取法提取楮实子中的氨基酸，此方法中影响提取率的因素主要有：料液比、提取溶剂浓度、提取次数、提取时间和提取温度。 测定波长的选择 配制0.1mg/mL的标准L—酪氨酸溶液。 样品的制备。称取褚实子10g，用70%乙醇，按料液比1：10，于70℃回流2h，提取1次，将溶剂蒸干后用蒸馏水定容于50mL容量瓶中备用。 分别取标准液和样品液各1mL，加入2%茚三酮溶液1mL和磷酸盐缓冲液2mL，摇匀后均于水浴中加热15分钟，取出，冷却，用蒸馏水定容至50mL。再取1mL样品溶液稀释至8mL，在紫外—可见分光光度计中进行波长扫描，每种液体平行做三次，取平均值，两相比较，确定最大吸收波长。 2.氨基酸提取实验 （1）提取溶剂浓度的影响 提取溶剂浓度（%） 料液比（mg/mL）mL）mL）mL）mL）