兽用黄芪多糖注射液生产新技术研究.pdfVIP

相 比，多糖含量最高 、最纯，缺点是后续提取 、药渣处理比较复 (2)不 同放置时间对果胶酶 、淀粉酶酶解的影响。加入 5％ 杂，与水煮醇沉法相比提取的多糖粗提物得量 、收得率低，在实 淀粉酶、果胶酶，分别在3h，6h，9h，12h，15h下放置，取上清液 际应用中也比较少。 稀释测OD值，确定最佳酶解放置时间。 鉴于以上各类提取方法存在的局限性，本文，笔者主要针对 (3)不同温度对蛋白酶、果胶酶酶解的影响。分别在3O℃， 兽用黄芪多糖注射液新型提取技术——酶提取法进行研究，利 40qC，50℃，60℃，70℃下搅拌，放置 10h后过滤 ，取上清液稀释 用酶解技术减少提取时间、降低提取温度，增加提取物中有效成 测OD值，确定最佳酶解温度。 分含量 ，使产品有效成分含量高且质量稳定，对环境无污染。 3．壳聚糖絮凝条件的确定。 二、酶提取法工艺技术原理 (1)不同絮凝剂浓度对絮凝效果的影响。在pH值 自然的条 近年来对黄芪多糖的抗病毒性能研究较多，采用黄芪多糖 件下，加入壳聚糖醋酸溶液，使浓度分别为200mg／L，400mg／L， 注射液生产的关键是确保黄芪多糖的提取和纯化、产品质量的 600mg／L，800mg／L，1000mg／L在室温下搅拌，静止30min后过 稳定性及有效成分的保留。该技术利用酶具有催化效率高、专 滤，取上清液稀释测OD值，确定最佳絮凝剂浓度。 一 性强 、作用条件温和等特性。根据酶的这些特性 ，在提取工艺 (2)不同pH值对絮凝效果的影响。用NaOH和HCL将提 中加入纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，分别对纤维素、果胶和蛋 白 取液液分别调成3，4，5，6，7，加入絮凝剂，在室温下搅拌，静止4O 进行分解，可提高有效成分收率 ，提高中药材的使用度，使中药 rain后 ，过滤，取上清液稀释，On,0OD值，确定最佳絮凝效果pH值。 材细胞壁破壁 ，使果胶 、蛋白等不稳定的成分得到有效分解沉 (3)不同搅拌时间对絮凝效果的影响。分别在 1rain，5rain， 淀，并且它们均为蛋白质，能在下一步的絮凝澄清中除去。技术 10min，15rain，20rain下搅拌，静止40rain后过滤 ，取上清液稀 难点在于纤维素酶、蛋白酶、果胶酶和壳聚糖絮凝的加入量和加 释测OD值 ，确定最佳搅拌时间。 入条件的确定 ，以及运用新工艺从整体上提高中药注射液的制 (4)不 同温度对絮凝效果的影 响。分别在25qC，3Occ， 剂水平，从而确保中药制剂质量与疗效的稳定。 35cC，40℃下搅拌，静止40rain后过滤，取上清液稀释测OD值 ， 三、酶提取法工艺条件分析 确定最佳搅拌温度。 1．纤维素酶的加入量及条件的确定。 四、技术指标 (1)纤维素酶不同加入量对成分提取的影响。处方量各味 1胜 状。黄色或黄褐色液体，长久储存或冷冻后有析出。 中药加 10倍水量 ，分别加入0．25％，0．5％，1％，1．5％，2％的纤维 2．pH值。为5．0—7．0。 素酶并加热至50℃，保温6．5h，加热煮两次，第二次加5倍水量， 3．生物活性。给药组与对照组平均脾指数的差值应≥1。 合并两次煎液，浓缩到与原药材 比例约为 1：1．5时，冷却至40℃ 4．异常毒性。按规定供试小鼠，经静脉注射、皮下注射 、腹腔 左右，加入果胶酶和蛋白酶量为药液体积的4％，放置 10h；将上 注射、口服给药，48h没有死亡。 述煎液加热煮沸30rain，加入两倍体积的纯化水，加热至80℃左 5．含量 。含黄芪多糖 以葡萄糖 (cH。：0)计 ，为标示量的 右，再加 1％壳聚糖醋酸溶液为药液体积的10％，搅拌，放置 10 90．0％一110．0％。 h，倒出上清液，调节酸碱度，过滤，浓缩，灭菌 ，灌装，测黄芪甲苷 五、工艺特点 含量 ，确定最佳纤维素酶加入量。