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淀粉衍生物新技术、新产品、新设备牛产及应用技术交流展示会论文集 低聚糖 酶法生产低聚木糖 山东省食品发酵工业研究设计院 袁建国 侯永勤程显好贺连智 济南高新开发区京鲁生物技术研究开发中心 张友军 刘 鹏夏艳艳 前言 连续传代五次，酶活力稳定，未出现衰退变异现 象。 低聚木糖是指由2—7个木糖以p一1，4糖苷 链连接而成的低聚糖的总称。该糖不被人体消化吸 1．3菌种的分类鉴定 收，但具有双歧杆菌增殖功效，与其它功能性低聚 根据伯杰氏细菌鉴定手册，对该菌种进行了初 糖相比，低聚木糖具有增殖双歧杆菌用量小、耐 步鉴定，鉴定结果如下：最低生长温度5—15℃， 热、耐酸、粘度低及代谢不依赖胰岛素等 最高生长温度45～49℃，菌体长2—3微米，宽 优点。 0．6—0．7微米。孢子柱状中生，无明显膨胀，革 酶法生产低聚木糖是以木聚糖为底物通过内切 兰氏阳性。周生鞭毛，能运动，液化明胶能力强， 木聚糖酶水解木聚糖的p一1，4糖苷链而得到以木 不水解淀粉，发酵葡萄糖产酸不产气，可以利用阿 二糖和木三糖等为主要成份的低聚糖的混合物。本 拉伯糖、木糖、甘露糖代替葡萄糖产酸，V—P反 研究是利用细菌产生的木聚糖酶分解经预处理的玉 应阳性，过氧化氢酶阳性，卵黄反映阴性。在含 米芯木聚糖生产低聚木糖。分别进行了菌种选育、 7％氯化钠的培养基中可以生长，在柠檬酸盐琼脂 酶制剂生产及低聚木糖中试生产等研究工作。 上产碱，不能还原硝酸盐为亚硝酸盐，适应生长的 1．菌种筛选 PH范围宽，从PH5．0一PH8．0均能良好生长。 1．1菌种 2．培养条件优化 从自然界中分离出一株产木聚糖酶的芽孢杆 分别优化了培养温度、培养时间、培养基PH 菌。 等培养条件，并对不同浓度下的麸皮、淀粉、木 1．2诱变育种 糖、蔗糖为碳源的产酶情况，鱼蛋白胨(上海产)、 骨蛋白胨(四川产)、豆饼粉、水解豆饼粉为氮源 (1)出发菌株：芽孢杆菌2—4，酶活力120u／ Hll 的产酶情况进行了比较，同时进行了添加不同剂量 (2)诱变方式： 的进口木聚糖(固体)、玉米芯木聚糖(自提固 a：U．v单独处理 体)、玉米芯液体木聚糖(自提)为诱导物的产酶 b：u．v+NTG复合处理 情况比较。在以上培养条件的研究的基础上，对麸 C：NTG单独处理 皮、蛋白胨、液体木聚糖三个主要条件进行了正交 (3)诱变结果 试验，最后确立了培养条件。 以U．v．NTG复合诱变处理后得到高酶活力菌 3．酶的一般性质 株，编号为2—4—9，酶活力达450u／ml以上，经测定了温度对酶活力的影响、PH对酶活力的 ·94· 低聚糖 淀粉衍生物新技术、新产品、新设备生产及应用技术交流展示会论义集 影响、酶的熬稳定性、酶酶PH稳定性等酶的一觳 4．2工艺条件：种子