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临床与实验病理学杂志
维普资讯
临床与实验病理学杂志 _,Cli,lExpPathol2007Aug;23(4) 。491·
机械一酶消化法是先用机械法将组织初步分散再用酶 单细胞悬液,机械 一酶消化法是较好的制备方法。在制备固
进一步消化分离。这里采用的机械法较机械分散法温和,细 定实体组织单细胞悬液时,机械分散法的效果与机械 一酶消
胞损伤率不高。实体组织的酶主要有 胃蛋白酶、胰蛋白酶和 化法差不多,但是在操作上前者要简捷方便的多且费时少。
胶原酶3种。酶对实体组织的分散作用主要是水解组织间 所以机械分散法是制备固定实体组织单细胞悬液中较好的
的胶原纤维和黏多糖物质,分开细胞间的紧密连接,达到制 方法 。
备单细胞悬液的目的 J。用酶消化时要根据组织选择相应
参考文献 :
的酶及作用条件 ,含有大量结缔组织的肿瘤如食管癌 、乳癌、
皮肤癌等应用胶原酶为主,胶原酶具有在钙离子、镁离子存 [1] 倪灿荣.免疫组织化学实验新技术及应用 [M].北京:北京科
在或在血清状态下不发生活性减低的特点。本实验用的材 学技术出版社 ,1993:34—38.
料多是上皮组织及癌组织,所以用胶原酶 Ⅱ溶液在 37℃温 [2] LobnerD.ComparisonofLDHandMrrrassaysforquantifyingcell
箱内消化。胶原酶 Ⅱ对胶原的消化作用很强,它仅对细胞间 death:validityofrneuronalapoptosis[J]?JNeurosciMethods,
2000,96(2):147—152.
质有消化作用而对上皮细胞影响不大,适用于消化分离纤维
[3] 李 宾,周春喜.用Medimachine系统制备实体组织的单细胞
性组织、上皮及癌组织。机械 一酶消化法在操作上比机械法
悬液 [J].临床与实验病理学杂志,1999,15(4):352—353.
繁琐费时,但细胞形态的保存较好,完整细胞的数量较多、细
[4] 王伯 ,李云松,张远强,等.病理学技术 [M].北京:人民卫
胞碎片较少、基本上无细胞团块。当标本为新鲜组织时出现
生出版社 。2000:857—863.
了杆菌污染,这是由于用胶原酶 Ⅱ溶液在 37℃温箱下消化,
[5] 司徒镇强,吴军正,细胞培养[M].北京:世界图书出版公司,
而 37℃是在杆菌生长温度范围内,所 以易造成污染。若是 1996:62—69.
固定组织则基本上不会出现细菌污染。 [6] 张召辉,夏安周,陈复兴,等.移植胰腺组织单细胞悬液制备方
综合以上分析,我们认为具体制备实体组织单细胞悬液 法的比较 [J].中国新医药杂志,2004,3(9):42—43.
应该视不同特性的组织和实验 目的而定。在 以新鲜实体组 [7] 董敬朋,陈艺华,张素娟.石蜡包埋乳腺癌组织单细胞悬液的
织为材料时机械分散法 、机械 一化学法较难获得足够浓度的 制备 [J].临床与实验病理学杂志,1996,12(2):94.
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