甾体激素类药物含量测定方法应用研究进展.pdfVIP

医药导报2013年8月第32卷增刊 ·135· 甾体激素类药物含量测定方法应用与研究进展 张青，唐跃年 (上海交通大学医学院附属新华医院药剂科，上海200092) 摘要 甾体激素类药物含量测定可以采用多种方法，同时，一些新实验方法的出现和应用也拓宽了选择种类。该 文简要介绍了高效液相色谱法、高效液相色谱法与其他方法联用，以及分光光度法和比色法的应用及研究进展。 关键词 甾体激素；含量测定；色谱法，高效液相 中图分类号R977．1；R927．2文献标识码A 甾体激素类药物是指一类具有甾体结构的激素类药物，其 60；流速：1．0mL·min～；检测波长：203am：柱温：40℃。对照 结构中均具有环戊环并多氢菲的母核。甾体激素类药物主要 品溶液的制备：精密称取105℃干燥至恒重的4种重楼皂苷对 包括了肾上腺皮质激素和性激素两大类。目前，甾体激素类药 照品各10mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇 物实现化学全合成的比较少，大部分在研究中或已经证实存在 匀使浓度分别为0．2g·L～，作为对照品溶液。供试品溶液的制 生理活性的甾体激素类药物来自天然植物。因此，甾体激素类 备：准确称取重楼样品粉约1g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇20 药物的含量测定也变得多样，同时也因为植物中成分复杂，使 mL，超声处理(功率250W，频率25kHz)20rain，过滤，残渣用 得某些甾体激素类药物的含量测定准确度比较差，进而同时测 甲醇分次洗涤。重复超声3次，合并每次滤液与洗涤液，水浴 定一组具有相结构活性相似的物质。 蒸干，残渣用甲醇溶解，过孔径0．45¨m滤膜并定容至10mL。 1高效液相色谱法(HPLC) 系统适用性实验得到了较好的分离效果。而实验的线性关系、 1．1 精密度、重复性、稳定性以及回收率也均有不错的实验结果。 常规HPLC法HPLC法在甾体激素类药物的含量测定 中应用较广，孟婧矗等1’采用该法测定了发酵液中醋酸可的松 1．3 HPLC与其他检测器联用 及醋酸泼尼松的含量，其色谱条件为：色谱柱采用Phenomenex 5u mm×4．6 郭继红等。4o利用HPLC～ELSD进行了知母中菝葜皂苷元含 prodigySilical00A(250mm，5¨m)；流动相：二氯 mL· 甲烷一乙醚一甲醇一水=86．0：12．0：1．6：0．4；流速：0．8 rain～；检测波长：240Ilm；柱温；25℃；外标法检测。样品处理： 蒸发光散射检测器，色谱条件：色谱柱采用InertsilC。一，(4．6 x mm×250 mL· mm，5 取简单节杆菌斜面，用无菌水制成3 106个·mL“的孢子悬 Ixm)；流动相：甲醇一水=88：12；流速：1 mL发酵培养基的250mL三角瓶 rain～；进样量：20止；柱温：室温；检测器条件：漂移管温度80 液，取0．3mL接种于盛有30 中，于摇床上32oC、160r·min‘1振荡培养24h，投入醋酸可的 ℃；气体流速：1．99L·min“下进行测定。 松使其终浓度达到1％，摇床上34℃、160r·rain‘1再继续培养 样品溶液的制备：知母样品经干燥粉碎后准确称取1g，用 48 mL 80 h，得发酵液。取发酵液2．0mL于分液漏斗中，加入5．0 mL乙醇于索氏提取器中提取，提取液用旋转蒸发仪回收溶 mL微型离 剂，残渣加2mol·L“盐酸20m