构建具有大麦脂转移蛋白1+分泌能力酿酒酵母.pdfVIP

132 2010, Vol. 31, No. 01 食品科学 ※生物工程 张洪波，阮 晖，玛丽开，郭 钦，张 伟，陈启和，郑晓冬，何国庆* (浙江大学生物系统工程与食品科学学院，浙江杭州 310029) ：为了增强纯生啤酒的泡沫性能，从酿酒酵母表达质粒YEplac181 出发，将大麦脂转移蛋白1(LTP1)成熟 肽的编码序列置于酿酒酵母ADH1 启动子(alcohol dehydrogenase promoter)和CYC1 终止子(cytochrome C terminator)的 调控下，构建大麦脂转移蛋白1 的酿酒酵母表达质粒YEp181-KAMLC 。通过酿酒酵母α- 信息素信号肽的引导分 泌，酿酒酵母表达的成熟大麦LTP1 被分泌到发酵液中。对发酵液的检测表明，在发酵132h 后LTP1 的产量可达 到29.45mg/L 。 ：酿酒酵母；大麦脂转移蛋白1 ；啤酒泡沫；表达 Construction of Saccharomyces cerevisiae Strain with Barley Lipid Transfer Protein 1 Secretory Capability ZHANG Hong-bo ，RUAN Hui ，MA Li-kai ，GUO Qin ，ZHANG Wei ，CHEN Qi-he ， ZHENG Xiao-dong ，HE Guo-qing* (School of Biosystems Engineering and Food Science, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China) Abstract：In order to enhance the foam stability of green draft beer, barley lipid transfer protein 1 (LTP1) encoding DNA sequence from Hordeum vulgare was modified to construct yeast Saccharomyces cerevisiae expression plasmid YEp181-KAMLC of barley LPT1 using the plasmid YEplac181. The expression of barley LTP1 was regulated by alcohol dehydrogenase promoter (ADH1 promoter) and terminator cytochrome C terminator (CYC1) of Saccharomyces cerevisiae, and the matured form of barley LTP1 was secreted under the lead of α-mating factor 1 signal peptide. Fermentation for 132 h at 30 ℃ gave a yield of barley LTP1 as high as 29.45 mg/L. Key words ：Saccharomyces cerevisiae ；lipid transfer protein 1 ；beer foam ；expression 中图分类号：TS261.1 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2010)01-0132-05 啤酒泡沫是消费者在选择啤酒时所要考虑的主要因 沫；少量的金属离子可以使泡沫更加持久。然而，在这 素之一，也是啤酒酿造工业用来衡量啤酒质量的重要指 些促进泡沫的成分中，蛋白和多肽起着最重要的作用[2-3] 。 标[1] ，品