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第17卷 第1期 大 连 民 族 学 院 学 报 Vol.17,No.1
2015年1月 Journal of Dalian Nationalities University January2015
文章编号:1009-315X(2015)01-0027-04
杨树嫩茎质外体中脯氨酸含量
测定方法的建立
a b b b a
马金龙 ,姜国斌 ,金 华 ,郭 鹏 ,吴 懿
(大连民族学院a. 生命科学学院;b.环境与资源学院,辽宁大连 116605)
摘 要:采用高效液相色谱法HPLC对微透析液进行痕量脯氨酸的检测,研究了痕量脯氨酸柱前衍生化
的方法。 采用苯异硫氰酸酯PITC-乙腈溶液和三乙胺 -乙腈溶液对透析液中痕量脯氨酸进行衍生化
后,通过环己烷萃取,得到透析液中痕量脯氨酸衍生化的最适方法,无需后续处理可直接进样,并确定了
HPLC检测条件:岛津Inertsil ODS-SP色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm);柱温:31 ℃;流动相A:0.05
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mol ·L 醋酸钠溶液;流动相 B:乙腈 -流动相 A(1 ：1);洗脱条件:A ：B(50 ：50);流速:1.0 mL ·
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min ;检测波长:254 nm;进样量:20 μL。 脯氨酸加标回收率为95.1% ~104.2 %。 同时,对3种杨树质
外体透析液中的脯氨酸进行了测量。
关键词:脯氨酸;微透析;杨树;HPLC
中图分类号:Q507 文献标志码:A
Determination of Proline Content in Apoplast of Poplar Stems
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MA Jin-long ,JIANG Guo-bin ,JIN Hua ,GUO Peng ,WU Yi
(a.College of Life Science;b.College of Environment and Resources,
Dalian Nationalities University,Dalian Liaoning 116605,China)
Abstract:Based on microdialysis experience in apoplast of poplar stems,the trace of proline in
plant was detected by using the High -performance liquid chromatography (HPLC) method,
precolumn derivatization methodwasstudied. Phenyl isothiocyanatePITC- acetonitrile solution
and triethylamine acetonitrile solution were applied to derivate the proline. Cyclohexane was
used to extract proline,the sample could be directly injected in HPLC without subsequent pro-
cessing. The detection conditions were determined:the SHIM
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