高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素B1.pdfVIP

＆溉埘磁孔蝴黝蛔旷删h油心叻 1．3实验方法 1．3．1 样品中AFrB。提取与纯化 称取209粉碎 样品于250mL具塞锥形瓶中，加入30mL(玉米、大米 样品)或50mL(花生样品)石油醚和100mL甲醇一水 (55：45)。瓶口封严，振荡提取30min，静置后经快速 定性滤纸过滤于250mL分液漏斗中，待分层后放出 下层甲醇一水溶液。取20．0mL甲醇一水于另一分液漏 斗中，加入20mL三氯甲烷，振荡25min后静置分层， 放出下层氯仿层，同时经装有109事先用氯仿湿润 的无水硫酸钠的慢速定量滤纸过滤于50mL蒸发皿 图1 标准AFTB，HPLC色谱图 中。在分液漏斗中加5mL氯仿，重复振荡，氯仿一并 具有很好的线性关系。经计算其线性回归方程为y= 放出，过滤后并于蒸发皿中。再用少量氯仿洗过滤 3．10】【一O．63，相关系数仁0．9999。 器，洗液也一起并于蒸发皿中。将蒸发皿放于65℃水 2．2回收率、精密度及重复性评价 浴中，通氮气蒸干后放于4℃冰箱中冷却2min，准确 在已知不含AFT的209玉米、大米和花生样品 加入1．00mL苯一乙腈(98：2)，快速充分溶解蒸发皿中 AFT标准品，按上述 残渣，溶液转移至1．5mL棕色样品瓶。该样品瓶中即 中，分别加入50．0ng和100．Ong 的处理方法提取、净化，测定AFrB。的含量，计算回 为AFI’样品提取液。 收率及变异系数，结果见表1。由表1可见，平均变异 1．3．2 衍生 本研究采用耵’A柱前衍生将AFrB。 系数RSD为6．09％。平均回收率为85．7％，稍低于使 衍生成强荧光AFT耽，以提高AFTB，测定灵敏度嘲。 用纯化柱的实验结果(回收率为90％左右)，但完全 将样品瓶中An提取液于50℃通氮气吹干，再向其 能够满足测定的要求嘲。 中加入100斗L三氟乙酸(TFA)衍生。剧烈振荡充分 2．3玉米、大米、花生样品分析结果 混合后，室温静置15min，再次置于50℃通氮气挥干。 玉米、花生样品在HPLC分析中，AFTB。均能较 加1mL流动相定容，样液经0．2斗m微孑L滤膜过滤，供 好地在近6min时分离出峰，其HPLC色谱图见图2、 HPLC分析。 图3。大米样品的色谱图与玉米的相似。 113．3样品测定样品经0．2斗m微孔滤膜过滤，供 运用上述的HPLC方法对采集于广东、广西、湖 HPLC分析。进样量35斗L，根据测得各组分保留时间 北和湖南的玉米、大米、花生共3类150个粮食样品 和峰面积与标准系列比较，进行定性定量分析。 中黄曲霉毒素B。污染状况进行了分析，结果见表2。 1．4标准曲线 其中样品中AFTB。是否超标的判断以中国对食品 吸取2、5、10、20、40、60、80、100、200斗L上述稀 中AFrB。的最高允许含量为