曼氏血吸虫发育过程中基因组DNA变异.pdfVIP

维普资讯 一 7》 7 动 物 学 研 究 1994，15(4)：67 7l CN 53—1040／Q ISSN 0254-5853 Zoolo calResearch 曼氏血吸虫发育过程 中的基 因组 DNA变异 樊晋江 {浙江省 医学科 学院寄生 虫病研 究所 ’ 杭州 310013) Paul、＼Brindley 、} ＼ 混 髓眦 蜊矾拦 国 摘要 曼 氏血嗳虫 (Sch~tosomamansoni)和 日本血 吸虫( ponicum)成虫和曼 氏血吸虫 尾蚴基因组 DNA 经限制性内切酶 Bam H I消化后，分别 与 P dCTP标记的来源于桉糖体 DNA 的 pSM HCR5、pSM HCR4PSM 889探针杂交。曼 氏血嗳虫尾蚴和成虫在 pSM HCR4 杂交带型的 16—28kb之 ，存在有 明显不 同的孜杂交带 ；而 pSM HCR5和 pSM 889的杂 交带 型，无 明显差异 。此外，pSM HCR5杂交带型 中， 日本血嗳虫成虫无 3．0kb带，可 明显 区别于曼氏血吸虫。结果表明，在曼氏血嗳虫尾蚴 至成虫的发育过程中，基 因组 DNA发生缺 失或重组。这一发现进一步证实 了曼氏血吸虫毛蚴与成虫 间存在发育期特异性 DNA的假设。 曼氏血吸虫发育过程中，基因组 DNA 的动态变化可能与其适应环境有关。 关键词 曼氏血吸虫，个体发育，基 因缺失，DNA杂交 限制性 内俑 · 血吸虫在螺蛳和哺乳动物寄主 中发育，经历着巨大的形态、生理和生化上的变化。血 吸虫在螺蛳体 内行无性繁殖，而在哺乳动物体 内交配、产卵行有性生殖。毛蚴和尾蚴均需 与外界环境短期接触后，寻求寄主才能进一步发育。 虽然 已有关于血吸虫发育过程 中基 因组 DNA变异 的报道 (Nara等 ，1990)，但是有 些学者 (McCutchan等 ，1984)~1认为血吸虫不 同生活史阶段的基 因组 DNA 多态非常相 似 。在某些真核生物 中，已发现发育过程 中的基 因重组现象与抗性差 异 (Seidman等 ， 1978)、细胞表面 抗原变异 (VanderPloge等 ， 1989)、卵壳蛋 白基 因的表达 (Sprindling 等，1980)有关。 本 文为进 一步证 实血 吸虫发 育过程 中基 因组 DNA 变 异，我们 对 曼 氏血 吸虫 (S．mansoni；OZ．A株)尾蚴和成 虫，另一株曼 氏血吸虫(S．manson；NMRI株减 虫以 及 日本血吸虫(S．japonicum~安徽株)成虫用 3种不 同核糖体 RNA基 因探针进行 了分子 杂交实验。 l 材料和方法 血吸虫成虫和尾 蚴 曼 氏血 吸虫 (．mansoni；OZ．A 和 NMRI株)成虫 尾蚴 ·世界卫生组织蠕虫病研究合作 中心 车文 1993年 10月 4日收到，1994年 3月21臼修 回 维普资讯 动 物 学 研 究 I5卷 (OZ A株)，以及 日本血吸 ( japonicum；安徽株)成虫，均 由澳大利征 昆士兰医学研究 所舟予生物学实验室提供 。 基 因组 DNA制备：约 100条成虫或大批量尾蚴用生理盐水洗净后置于小量提取液 中 (50mM Tris—HC1，50mM EDTA， 100mM NaCl，pH8．o)，将 虫 体 研 磨 匀 浆 ，加