携重组人血管内皮抑制素脂质微泡的制备及其抑制血管生成与研究.pdfVIP

测量肿瘤大小，绘制肿瘤生长曲线。给药后第35天，行彩色多普勒超声检查，观察肿 瘤形态、内部回声、边界、血流信号等。处死裸鼠，剥离肿瘤计算肿瘤生长抑制率，病 结果 1．采用乳化溶剂挥发法制备的PMCD呈圆球形、表面光滑、分散良好，平均粒径 了7．2％，至第40天累积释放了85．7％，无明显突释效应； 2．体内抗肿瘤作用 (1)模型组裸鼠移植瘤体积明显增大，多西他赛低剂量组、多西他赛高剂量组、 PMCD低剂量组移植瘤生长速度较缓慢，PMCD高剂量组移植瘤生长明显受到抑制， 体积小于其他实验组； (2)治疗35天后彩色多普勒超声检查，PMCD高剂量组肿瘤明显缩小，实质回 声不均，血流信号明显减少； (3)PMCD高剂量组裸鼠肿瘤质量明显小于模型组，二者比较差异有非常显著性 意义(P0．01)，其肿瘤生长抑制率达65．7％，亦明显高于多西他赛瘤内注射组及 PMCD低剂量组； (4)病理学检查PMCD高剂量组肿瘤组织大片变性坏死； (5)荧光定量PCR显示，多西他赛低剂量组肿瘤耐药基因MRDl表达上调，而 PMCD高剂量组MRDl表达明显下调，而MRP、BCRP表达差异不明显。 结论采用乳化溶剂挥发法制备的多西他赛缓释微球载药率、包封率高，体外释放 平稳，超声引导下瘤内注射间质化疗具有明显抑制荷人乳腺癌裸鼠移植瘤作用，并且抑 制乳腺癌多药耐药蛋白表达。 【关键词】 超声；微球；多西他赛；乳腺癌；多药耐药 携重组人血管内皮抑制素脂质微泡的制备及其抑制血管生成研究 林礼务薛恩生 陈志奎张秀娟柯丽明 福建医科大学附属协和医院超声科福建省超声医学研究所(350001) 目的 采用生物素一亲和素桥接法制备一种携重组人血管内皮抑制素的脂质超声微 泡，考察其理化性质，探讨其体外抑制血管生成作用。 方法 1．载药超声微泡的制备与表征 (1)机械震荡法制备生物素化脂质微泡，与亲和素9呼育，制备亲和素一生物素化微 泡；生物素化重组人血管内皮抑制素；将亲和素一生物素化微泡与生物素化重组人血管 内皮抑制素孵育，即得载药微泡； (2)流式细胞术检测重组人血管内皮抑制素与生物素连接率； (3)光学显微镜、荧光显微镜观察载药微泡形态及载药情况，激光粒径仪测量粒 径大小，ELISA检测载药率，超声造影观察小鼠肝癌显影情况； 2．体外抑制血管生成作用 (1)采用酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞HUVECS，免疫组化鉴定； 胞对重组人血管内皮抑制素摄取率； (3)鸡胚尿囊膜血管生成抑制试验：设单纯重组人血管内皮抑制素、载药超声微 泡、超声辐照载药微泡组，治疗48h后分析比较血管数目。 结果 u 径(40．4)l-tm，82．4％微泡直径在2—7m范围内，微泡载药率为(3．36+0．45)％； 2．超声造影显示，肿瘤强化明显，相关参数与SonoVue无明显差异； 3．超声辐照载药微泡治疗明显抑制人脐静脉内皮细胞增殖，ELISA测得lh、2h 具有统计学意义(P0．05)； 结论 采用生物素一亲和素桥接法制备的携重组人血管内皮抑制素粒径分布均匀、 载药量高，超声辐照击破载药微泡治疗具有明显的抑制血管生成作用。 【关键词】 超声；微泡造影剂；重组人血管内皮抑制素；血管生成；肝癌