糖化血红蛋白的测定方法和临床应用.pdfVIP

2011年 3月 109 糖化血红蛋白的测定方法及临床应用 陈吉虎 摘 要：糖化血红蛋 白(glycosylatedhemoglobin，GHb)反映血糖控制程度 ，是监测糖尿病血糖控制、疗效考核的金标准。临床实验室常用 的测定GHb的方法有30余种 ，依据反应原理不 同分为2类：第一类基于GHb与非GHb的电荷不同，包括阳离子交换色谱法、电泳法、等电 聚焦法等；第二类基于GHb的结构特点，包括亲和色谱法、免疫法等。糖尿病控制与并发症试验 (diabetescontrolandcomplicationstria，l DCCT)研究显示，当GHb控制在平均7％左右时，可使糖尿病并发症大为减少，其 中视 网膜病变减少76％，微量白蛋 白尿 (肾病)减少39％， 神经病变减少60％。糖尿病慢性并发症的发生、发展不仅与整体血糖水平相关，而且与血糖波动性密切相关。血糖大幅波动可能通过 激发多种代谢途径而导致微血管和大血管损伤㈣ 。血糖控制欠佳的糖尿病患者易合并感染，可显著增加致死致残率3[1。GHb作为糖尿 病血糖监测的有效指标 ，可以指导对糖尿病患者的病情评估、制定治疗方案。本文对临床常用的检测方法及其临床应用进行综述。 关键词 ：糖化血红蛋白检测方法；监测价值 中图分类号 ：R446．11 文献标识码 ：B 文章编号 ：1006—0979(2011)06—0109—02 1测定 GHb的方法及其影响因素 HbA、HbA 、HbF、HbS及 HbC等 ，可完全避开各种物质的干扰，是 目前临床实验室中应用的糖化血红蛋白检测方法主要有两 一 种理想的方法 ，但仪器价格相当昂贵，难于用作常规检测。 大类：一类方法基于糖化血红蛋 白与非糖化血红蛋 白所带的电荷 1．5亲和层析 O【l：利用生物高分子能与相应 的专一配基分子可逆 不同。如离子层析法、电泳等方法；另一类方法基于血红蛋 白上糖 结合的原理，将配基通过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲 化基团的结构特点，如亲和层析、离子捕获法和免疫法等。其中高 和吸附系统，带有杂质 的高分子分离 目的物在一定条件下，能以 效液相离子层析法(HPLC)被公认为金标法4[1。 某种次级键与已同相化 的配基结合 ，而杂质则不吸附，除去杂质 1．1离子层析法5[-7]：离子层析法精密度高、重复性好且操作简单， 后变换条件 ，又可以使待分离的高分子物质重新解离，获得纯化。 被临床广泛采用。检测原理由于血红蛋 白13链N一末端缬氨酸糖 优点：操作简单、快速、价廉 ，特异性强，不受异常血红蛋 白的干 化后所带电荷不 同，在偏酸溶液 中总糖化血红蛋 白(GHb)及HbA 扰，对经翻译以后修饰的血红蛋白和病理血红蛋 白的影响相对不 均具有阳离子的特性，因此经过阳离子交换层析柱时可被偏酸的 敏感，对血标本储存的时间也不象离子交换法那样严格。缺点：检 缓冲液平衡过的树脂来吸附，但二者吸附率不同，GHb正电荷较 测结果为糖化血红蛋白总量，不能测试 GHb的单一组份 ，且包含 少吸附率较低 ，HbA正电荷较多吸附率较高。用不同pH的磷酸 HbA 的糖化组份，因此将亲和色谱所测出的GHb称为总的GHb 盐缓冲液可以分次洗脱出GHb和 HbA，用 KCN可将 Hb转化为 是不确切的，严格来说是 占不同百分数的各种 GHb，目前对其测 高铁氰化血红蛋白，用分光光度计测定。或者得到相应 的Hb层析 定内容的命名国内外尚不统一。 谱 ，其横坐标是时间，纵坐标是百分 比。HbA1C值以百分率来表 1．6离子捕获法 ：近发展起来 的新方法 ，代表仪器有 Abbott的 示。现在大部分都用全 自动测定仪测定，用于地中海贫血等疾病 IMX，其原理是糖化血红蛋白与相应抗体结合后 ，联 以荧光标记 的诊断。但其缺点是价格昂贵，仅在一些发达国家使用 ，且容易受 物，形成一反应复合物，再联结带负电荷的多聚阴离子复合物 ，而 到如下干扰 ：胎儿血红蛋 白(HB—F)与 HbA 的带 电性很相近 ，在 在IMX反应孔 中的玻璃纤维预先包被了高分子的四胺合物 ，使 离子交换 HPLC分析图上可呈现一个独立的Hb—F峰，也可能与 纤维表面带正电，使前述的反应复合物吸附在纤维表面，经过