高效液相色谱法检测牛初乳sIgA方法研究.pdfVIP

维普资讯 《乳业科学与技术》 2007年第6期 (总第127期) 291 高效液相色谱法检测牛初乳 sIgA方法研究 刘晓飞 ，高学军 ，姚永豪 ，莫继先 ，程 静 ，周盛华 (1东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030；2哈尔滨康普乳品有限公司； 3中国农业科学院哈尔滨兽医研究所) 摘 要：建立高效液相色谱法测定牛初乳 sIgA含量。采用TSK—G3000PWxl凝胶色谱柱以0．02mol／L， pH 6．8的磷酸盐缓冲液为流动相，流速0．6mUmin，检测波长280nm。结果表明，牛初乳 sIgA纯度为 52．56％，回收率为74％。说明此方法方便、快捷、准确、可靠、重现性好，可用于牛初乳sIgA含量的检测。 关键词：牛初乳；sIgA；HPLC；检测 中图分类号：TS252．7 文献标识码 ：A 文章编号：1671—5187(2007)06—0291-03 Research on Determination ofBovine ColostrumssIgA by HPLC LiuXiaofei，GaoXuejun，YaoYonghao，MoJixian，ChenJing，ZhouShenghua。 (1KeyLaboratoryofDairy ScienceMinistry ofEducation，NortheastAgriculturalUniversity， HarbinofHeilongjiang150030，P．R．China；2HarbinKanpureDairy Co．，Ltd．； 3HarbinVeterinary ResearchInstitute) Abstract：0biective to establish HPLC method forthe determination ofbovine colostrums sIgA．sIgA wasseparatedonTSK—G3000PWxlcolumnwith0、02mo1／L．pH 6．8PBS．andflow ratewas0．6mL／min． sIgA wasdetected atUV 280 nm．Resultsshowedthatthepurity andyield ofsIgA were52．56％ and 74％，respectively．So the mothed isconvenient，rapid，accurate，reliable and reproducible．Itcan be usedofrthe detection ofbovine colostrumssIgA． Keywords：Bovine colostrum；sIgA；HPLC；detection 牛初乳 sIgA (secretory immunoglobulinA． RID)、放射 免 疫 测 定法 (Radi0immun0assav， sIgA)是由奶牛外分泌腺和黏膜相关的淋 巴组织 RIA)、酶联 免疫吸附测定法 (Enzymelinked 合成的一种免疫球蛋 白lll，主要 由两个单体 IgA、J immunosorbentassay，ELISA)l6．7_和免疫胶体金检 链和一个分泌片(secretory component，SC)连接 测法(Immunogold)嘲等方法。R1D方法特异性强、 而成圈，SC是 sIgA 特异性受体，借二硫键与 sIgA 操作简便 ，但敏感性差；RIA虽然灵敏度高，但需 共价结合嘲。牛初乳 sIgA 是纯天然功能因子，可 要同位素测定设备，且有放射性同位素损伤和污 以抑制细菌增殖、中和毒素、保护肠黏膜，并且能 染等弊端；ELISA方法特异性强，敏感性高，操作 抵抗蛋 白溶解酶作用，防止被消化失活 ，尤其在 简便，但是ELISA需要制备特异性抗体，使其应 黏膜免疫方面具有很高的医学价值。研究表明牛