双黄连对rIFN-α-%2c2a-抗柯萨奇病毒的协同作用.pdfVIP

I 9．双黄连对rFN—Q：。抗柯萨奇病毒的协同作用 吕海涛 衰走昌 牵重敬严文华 (苏州医学院附儿院 苏州 215003) 杨吉成 盛伟华 李丽娥董宁征 (苏州医学院基因室 苏州 21s007) 摘要 目的：为了探索双黄连对rIFN—d：，抗柯萨奇病毒作用的影响．方 sh和Veto细胞上进行 法；本文采用微量细胞病变抑制法、结晶紫染色法在wi 了双黄连、rIFN一Ⅸ2。及两者联用抗柯萨奇病毒(CVB3)的实验研究．结果：(1) 两药联用抗柯萨奇病毒呈明显协同作用；(2)0．125mg／ml的双黄连可使干扰素 (rIFH-a 4或1．71 2。)在wish或Veto细胞上抗柯萨奇病毒的效价分别提高3．1 倍左右．结论：该结果为临庆中西医结合疗法治疗柯萨奇病毒感染提供新的配 伍。 ，’{ 、’ 关键词双黄连；a2。一干扰素(什秆卜奄瓦)：柯萨奇病毒B3型(，cV蟊})。 道、肠道感染的常见病原，而且富内柯萨奇病毒感染也是诱发先天性心脏病的 最危险因素之一。病毒性心肌炎的发病率在心血管疾病的构成比例中日渐增 高，国内外的报道一致认为柯萨奇病毒是其蛙常见病原[I-2]。很多报道证实： 目前在小儿病毒性心肌炎中合并CVB感染的阳性率很高，国内最新报道达44— 47％E”，近年来病毒性心肌炎中该病毒持续感染可发展为扩张性心脏病的观点已 由心内膜活检和分子生物学检测技术的应用得到证实H]。因此，柯萨奇病毒感 染正严重危害着儿童健康。 国外有关干扰素抗CVB病毒的作用早有报道[S-7]。鉴于国外采用自然干扰 素联合疗法治疗CVB感染已有实验和临床报道，收效良好【8】，但未见基因重组 干扰素联合中药制剂的研究报告。为此，为了寻找中西医结合疗法抗CVB的有 效配方，我们在wi a2。抗CVB3感染的影响，其协同作用明显，现报告如下： 1材料和方法 1．1材料 1．1．1病毒株 英珍教授提供。在wish细胞上增殖，并用wi sh细胞微量TCID。。滴定法测定 其效价为10一／o．iml。 滤泡性口腔炎病毒(VSV)为本院基因室保存，在原代鸡胚细胞中增殖，在 15l wish细胞上测定其效价戈10-4／,0．iml。 1．工．2细胞株 人羊膜Wish细胞和非洲绿猴肾Vero细胞为本院基因室保 存。用含10％小牛血清的RPMI640培养基传代培养。 1．1．3药品与试剂双黄连粉针剂购自哈尔滨中药二二厂，600mg／L女，生产 批号为970609，使用时以i弩2％d、牛血清的RPMI 1640维持液稀释。rIFN-(1：。I．0 家卫生部[94]卫生标字0025。RPMI 色液：含结晶紫08％；结晶紫脱色液：乙二醇甲醚50％(V／V)。 I．2方法 1．2．I干扰素效价测定 所购于扰素采用wish细胞，7vsv一微量细胞病变抑制法测定效价旧]，结果 用干扰素标准品进行校正，以国际单位(IU／m1)表示。 1．2．2rIFN—o 2。、双黄连及两者联用抗CVB。半数有效量(ED5。)的测定㈣“““] I．2．2．LrIFN—a 2。抗．CVB3帕ED50。 将wish细胞(5x10 u 小时，去生长液，用PBS洗3次，每孔加入i00l递倍稀释的rlFN-Ⅱ2。，继 TCID 100 续培养12小时，弃去rIFN—a：。，每孔接种i050VCB3 ul，于37℃吸 u 附1小时后．每孔加入1001禽2％小牛血清的RP