膈下逐瘀汤逆转猪血清诱导大鼠肝纤维化的作用及机制研究.pdfVIP

sacrificed at the end of experiment, and liver were collected for analysis. The liver histopathology was examined by Masson trichrome staining. The content of MMP-13 and TIMP-1 in the liver were detected by enzyme linked immunosorbent assay. Real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction was used to analyze MMP-13 and TIMP-1 mRNA levels in the liver. Results: Compared with the porcine serum group, the histopathology of rats given Gexiazhuyu decoction improved significantly. The expressions of TIMP-1 mRNA and protein were decreased significantly, and MMP-13 mRNA and protein in liver were elevated significantly in porcine serum plus Gexiazhuyu decoction group (P 0. 05). Conclusions: Gexiazhuyu decoction may exert anti-hepatic fibrosis effect in rats via regulation ofMMP-13 and TIMP-1gene expression. [Key words] Gexiazhuyu decoction; Liver fibrosis; Matrix metallo proteinase; Tissue inhibitor of metalloproteinase 肝纤维化有很高的致病率和致死率[1] ，肝脏慢性病变如寄生虫、病毒感染、免疫源性 肝炎、遗传性金属超负荷、毒性作用等可引起肝纤维化。肝纤维化是肝脏炎症性病变进展为 肝硬化过程中的重要病理改变[2]，细胞外基质（extracellular matrix，ECM ）沉积是纤维化形 成的中心环节[3] 。ECM 过度沉积不仅由 ECM 合成增多引起，更大程度是降解减少的原因。 基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP ）可以分解不同类型的胶原，而金属蛋白酶 组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase, TIMP ）可以抑制MMP 的活性，二者表 达水平的改变共同影响 ECM 的合成与分解[4] 。血瘀是肝纤维化形成的基本病机，也是各种 肝病最根本、最重要的病理改变，故活血化瘀法应该贯穿于整个肝病治疗的始终[5] 。膈下逐 瘀汤为清代名医王清任创制的名方，具有活血祛瘀、行气止痛之功效，主治膈膜以下，上腹 部瘀血积块等证。作为治疗膈下瘀血证的代表方，膈下逐瘀汤对肝纤维化的防治具有很好临 床基础[6] 。本研究旨在观察膈下逐瘀汤对腹腔注射猪血清诱导大鼠免疫性肝纤维化模型肝组 织 MMP-13 和 TIMP-1 表达的影响，以探讨其抗肝纤维化的可能机制。 1 材料 1.1 实验动物 选用健康雄性 Sprague-Dawley 大鼠 60 只，体重（200 ± 10 ）g，由北京 维通利华实验动物技术有限公司提供（许可证编号 SCXK 京 2002-0003 ）。标准饲料由齐齐 哈尔医学院实验动物中心提供。 1.2 药品与试剂 膈下逐瘀汤由五灵脂 6 g 、当归 9 g 、川芎 6 g 、桃仁 9 g 、丹皮 6 g 、 赤芍 6 g 、乌药 6 g 、玄胡索 3 g 、甘草 9 g 、香附 4.5 g 、红花 9 g 、枳壳 4.5 g 组成，生 药购自齐齐哈尔市中医医院中药房。加水煎煮 2 次，第 1 次约 2 h ，第2 次约 1.5 h，合并水 煎液，浓缩，以蒸馏水稀释至生药 1.5 g/mL，置4 ℃冰箱备用。猪血清购自上海纬群生物技 术有限公司，大鼠