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大会交流 2010全国中西医结合危重病、急救医学学术会议
地黄低聚糖对体外培养的骨髓间充质干细胞增殖和ERK表达的影响
王新华h2王士雯2周荣斌1李泱2李宗斌2赵玉生2朱庆磊2刘昱圻2
1北京军区总医院急诊科1007002解放军总医院老年心血管病研究所100853
骨髓间充质干细胞是一种来源于骨髓具有自我 Cruz公司1。
鼠抗p-ERK(Santa
更新和多分化潜能的细胞系，在特定的条件下可以 1．2方法
分化为心肌样细胞，用于心肌修复。但MSCs在骨髓 1．2．1MSCs的分离培养。
1．2．2
中的含量极少，必须通过体外培养扩增才能满足临 MSCs的传代及纯化。
1．2．3
床需要。已有多项研究观察中药提取物对体外干细 RGOs对MSCs增殖的影响。
胞的作用，地黄是一味传统中药，地黄低聚糖是地 1．2．4RGOs对MSCs内ERK蛋白表达的影响。
黄的主要成分之一，具有促进骨髓造血干细胞增殖、 1．2．5统计学方法数据以均数士标准差(x士s)
调节免疫、保护心肌、抗糖尿病、抗肿瘤等作用。 表示，组间比较用单因素方差分析，P值0．05为有
统计学意义。
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径是细胞
外信号引起细胞核内反应的通路之一，ERKl／2是 2．结果
MAPK信号传导通路的枢纽，也是介导细胞增殖的 2．1MSCs形态特性原代培养的MSCs24h后
最重要途径。本研究观察了地黄低聚糖对MSCs增殖大部分MSCs均已贴壁，3～4d后细胞呈集落生长，
及ERK表达的影响。 其形态多变化为短梭形。7～10d基本铺满瓶底。传
1．材料和方法 代后细胞于24h内完全贴壁，传代第72h可见细胞体
1．1材料 积较原代细胞增大，大部分呈纺锤状或纤维状等多
1．1．1动物纯种7周龄Wistar大鼠，清洁级，雄种形态。
性，体质量180a=109，由解放军总医院动物实验中心2．2RGOs对MSCs增殖的影响结果显示
提供，合格证号：(京 RGOs低浓度和高浓度时对MSCs增殖均有促进作
1．1．2药品与试剂低糖DMEM培养基、胰蛋白
用，在10～100099·mL．1呈明显量效关系。至
酶(Gibco公司)；优级胎牛血清(FBS，Hyclone公司)；100pg／rra时继续增加浓度OD值未进一步增加反而有
双抗(青霉素、链霉素)；MTT(Amerisco公司)；
减少趋势，提示最佳浓度为100I．tg／ml(见表1)。
DMSO、5．氮胞苷(5-Aza)(Sigma公司)；兔抗ERK、
表l 不同浓度ROS对MSCs增殖的影响
OD
分组 ROS浓度() 490(i±s)
A 无细胞培养基 0．084士-0．013
B 0pg／ml 0．669士0．229
C 3I-tg／ml O．716士-0．571
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