三结构域重组FN多肽表达质粒的构建和其表达产物性质的初步鉴定.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’()*!+(*# 年 月 $%%% !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( ,-) $%%% - 12 . !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 三结构域重组! 多肽表达质粒的构建及其 表达产物性质的初步鉴定 李明才 冯作化 李 东 张桂梅 （同济医科大学医学分子生物学研究室 武汉 ） #3%%3% 摘 要 为探讨三结构域重组纤连蛋白（ ）在肿瘤治疗中的作用，构建了两个三结构域重组 表达质粒 4+ 4+ 4/#0 5 和 ，它们分别编码两个重组多肽： （ 的 经 和 相连）和 $ 4/#02$ 67$ 4+ 89(!$3/0:;9!1!1 ;= )?!/%0’?)$%#/ 5 （从 中删除了 端和 结构域 端的 ）。含表达质粒 的工程菌 672$ 67$ 7; @@6 6;))@@ + 89(!/130A)-!/2 4/#02$ 5 5 经 培养， 得到表达，表达产物主要以包涵体形式存在，经尿素变性与复性处理后，通过肝素 琼脂糖亲和 3B 672$ 0 层析纯化，纯化产物进行细胞粘附试验。 在大肠杆菌中的表达效率很低（ ），而 的表达效率很高 67$ 1C 672$ （ ），提示 分子中 结构域的 端顺序是影响三结构域重组多肽在大肠杆菌中表达的关键结构。纯化 $!C 4+ 6;))@@ + 的 具有结合肝素和结合细胞的功能，且结合细胞的能力比双结构域 更强。 的制备为进一步研究具 672$ 4+ 672$ 有更强的抑制肿瘤转移作用及免疫调节作用的基因工程制品奠定了基础。 关键词 纤连蛋白，重组多肽，肿瘤转移 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） D2!$ !%%%03%!0$%%%%#0%##0%# 纤连蛋白（ ， ）含有 个能与细胞 ；4/#01%是 重组多肽的表达质 4EF9(G;H=EG4+ $ $$$#5 6;))@07; @@