机械牵张对大鼠心室肌蛋白激酶B磷酸化及心钠素分泌的影响.pdfVIP

维普资讯 撤循环字 杂志，2007，17(4)：17～19，25 ◎ 2007 CHINESEJOURNALOFM1CROC1RCULAT1ON 机械牵张对大鼠心室肌蛋白激酶 B磷酸化 及心钠素分泌的影响* 蔡 新 吴关玲 李菁 许 璇 李跃华 [中图分类号] 363．1 [文献标识码] A [文章编号] 1005—1740(2007)O4—0017一O4 展…。本文采用离体牵张动物模型模拟在体急性心 脏超负荷 ，观察急性机械牵张对心脏 ANF分泌和 圆 黧 蠢Akt激酶活化的影响，以进一步探讨急性循环超负 荷导致心肌肥大的可能机制 。 1 材料与方法 1．1 实验动物 2O只健康 SD大 鼠，雄性 ，230～280g，由南京 医科大学实验动物中心提供 。 1．2 实验仪器及溶液 抗总 Akt、磷酸化Akt(ser4。)抗体购 自CellSigna— ling。ANF放射免疫检测试剂盒购 自北京科美东雅 公司。柯 氏液 (K—H)成分 (mmol／L)：dextrose11、 NaC1110、CaC121．2、KCl4．7、NaHCO320．8、KH2 PO 1．18、MgSO 1．17，以体积分数为 95％0和 5 CO混合气体饱和 ，pH 7．3～7．4，温度维持在 37。C。实验仪器主要有 Langendorff心脏灌流装置 (ADinstruments)、PowerLab8道生理记录仪 (AD— instruments)、Westernblot电泳仪及半干转移装置 (Bio—Rad)等 。 1．3 方法 1．3．1 实验分组 ：实验分为对照组 (一lO)和牵张 组 (”一10)，两组均给予 K—H液灌流 。 1．3．2 牵张模型 的建立及牵张过程 ：经腹腔注射 2O 乌拉坦 (1．2g乌拉坦／kg体重)麻醉。充分麻 醉后 ，固定，快速剪开大鼠胸腔，取出心脏 ，置于4℃ K—H液 中，将主动脉套上 Langen