血卟啉对人胰腺癌细胞Panc-1的光动力作用及机制.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 201I，27(9)：175l_757 · 1751 · [文章编号] 1000—4718(2011)09—1751—07 血卟啉对人胰腺癌细胞 Panc一1的光动力作用及机制 于 钟 ，钟 娃。，袁宇红 ， 陈其奎 ， 朱兆华 ， 张晋昕 (中山大学孙逸仙纪念医院消化科，广东 广州 510120；中山大学医学统计与流行病学系，广东 广州510080) [摘 要] 目的：研究光敏剂血卟啉的光动力作用对人胰腺癌细胞Panc一1的体外杀伤效应及其主要机制。 方法：将光敏剂浓度和光照剂量2个因素按不同水平分组 ，以CCK一8实验的吸光度值为检测指标并转换为细胞 存活率，研究这2个因素对光动力作用的影响及其规律。在此基础上，先后以荧光显微镜、流式细胞仪、Western blotting测定这一过程中细胞 内活性氧的水平、细胞坏死及凋亡 比率以及caspase一3蛋白的表达 ，探讨光动力作用 的主要机制。结果：随着光敏剂浓度和光照剂量的增加 ，光动力治疗 (PDT)后Panc一1细胞存活率相应下降，并分 别在光敏剂浓度 10mg／L、光照剂量20J／em 达到最大杀伤效应 。光敏剂浓度和光照剂量之间对降低细胞存活率 有协同作用。单独给予光敏剂和光照均不对细胞存活率产生影响。PDT作用可使 Pane一1细胞内产生活性氧 ，并 随光敏剂浓度和光照剂量的增加而增多。PDT后细胞出现凋亡和坏死 ，二者比例随光敏剂浓度和光照剂量的增加 而增加 ，但始终表现为凋亡率坏死率。PDT使细胞内caspase一3表达增强，并随光敏剂浓度和光照剂量的增加 而增加。结论：血卟啉光动力治疗对人胰腺癌细胞株Panc一1具有明确的杀伤作用，但是光敏剂和激光照射本身 并不具有独立的杀伤效应。光敏剂浓度和光照剂量2个影响因素在一定范围内与PDT效应之间呈正相关的关系， 二者之间存在协同作用。PDT的作用机制主要在于其产生的各种活性氧成分 ，通过各种途径激活caspase一3，最终 导致细胞凋亡。 【关键词] 光动力治疗；Panc一1细胞；血卟啉；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3 [中图分类号] R576 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．09．017 Photodynamicaction ofhematoporphyrin on human pancreatic cancer celllinePanc——1 YUZhong，ZHONGWa，YUANYu—hong，CHENQi—kui，ZHUZhao—hua， ZHANGJin—xin (DepartmentofGastroenterology，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，Chi— na；DepartmentofMedicalStatisticsandEpidemiology，SunYat—senUnivemity，Guangzhou510080，China．E—mail： 126．con) [ABSTRACT] AIM：Tostudythekillingeffectofphotodynamictherapy(PDT)withhematoporphrinonhuman pancreaticcnacercelllinePanc一1invitro．M ETHODS：ThePanc一1ceilsweredividedintoseveralgroupsaccordingto theconcentrationsofphotosensitizerandlightdosestowhichthecellswereexposed．TheabsorbnacevaluesofCCK一8test wereusedasthedetectionindexandwereconve~edtocellsurviva1．Tostudythemainmechanism ofPDT，theROSpro- duction，thea