血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂抑制动脉损伤后中膜平滑肌细胞血小板源性生长因子的表达及细胞迁徙.pdfVIP

维普资讯 · l636· 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiolo~ 2007t23(8)：1636-1638 [文章编号] 1000—4718(2007)08—1636—03 血管紧张素1I1型受体拮抗剂抑制动脉损伤后 中膜平滑 肌细胞血小板源性生长因子的表达及细胞迁徙水 舒 强 ， 凌光烈 ， 蒋 健 (中国医科大学附属第一医院外科局解教研室 ，辽宁 沈阳l10001； 上海中医药大学附属曙光医院内科 ，上海 200021) [摘 要] 目的：研究球囊导管损伤后早期血管紧张素 Ⅱl型受体(AT1)拮抗剂对损伤后大鼠动脉中膜平滑 肌细胞血小板源性生长因子 (PDGF)的表达及细胞迁徙影响。方法：l2周雄性 Wistar大鼠颈动脉用球囊导管损 伤，分成实验组和对照组，分别于术前2d给予血管紧张素 Ⅱl型受体拮抗剂 CV—l1974(5mg·kg～ ·d )和溶 剂。术后2d、3d、5d和 14d处死。用原位杂交、免疫组织化学和病理组织学进行研究。结果：实验组术后第2d、 3d和5d中膜平滑肌细胞PDGF—AmRNA和PDGF—A、PDGFB、PDGF— (R)、B(R)阳性细胞率以及迁徙率明 显低于对照组 (P0．01)。实验组的中膜平滑肌细胞表型处于收缩型。结论：血管紧张素 Ⅱl型受体拮抗剂明显 抑制损伤后动脉中膜平滑肌PDGF及其受体的表达和平滑肌迁徙。 [关键词] 受体 ，血管紧张素；血小板源性生长因子；动脉 ；肌，平滑，血管 [KEYWORDS] Receptors，angiotensin；Platelet—derivedgrowthfactor；Arteries；Muscle，smooth，vascular [中图分类号] R363 [文献标识码】 A 血管平滑肌细胞 (vasculrasmoothmusclecells，VSMC)由 3 动脉损伤后中膜平滑肌细胞DNA合成的影响 血管中膜向内膜迁徙并增殖是血管成形术后再狭窄的关键 分别在术后2d．3d、5d、14d将动物处死。正常动物作 问题，在这个过程 中有大量血管活性物质和生长 因子参 为对照，动物处死前30min，注射5一溴脱氧尿嘧啶(5一bro- 与…。血管紧张素 Ⅱ通过 l型受体在这个过程中起到了重 mo一2 deoxyuridine，BrdU)。组织包埋同上。 要作用，已知血管紧张素 Ⅱ可使 VSMC增殖和迁徙 J。为了 4 PDGF—A链探针制备及原位杂交 研究球囊导管损伤后早期血管紧张素 Ⅱl型受体 (AT1)拮抗 PDGF—A链 RNA探针制备采用以前我们的方法 J，动 剂对损伤后大鼠动脉中膜平滑肌细胞增殖和迁徙的机制，本 脉用 4％多聚甲醛 0．1mol／LPB溶液灌流固定 。制成石蜡切 实验观察 AT1拮抗剂对血小板源性生长因子 (plateletderived 片，进行杂交，各时点5只动物。组织包埋同上。 growthfactor，PDGF)及其受体的表达及对 VSMC迁徙影响。 5 免疫细胞化学 苯巴比妥钠麻醉 (0．8mr,／kg，腹腔注射)后心脏穿刺， 材 料 和 方 法 0．01mol／LPBS(pH7．4)血管灌流，紧接用甲醇 一Camoy液 1 动脉损伤模型 (甲醇：氯仿：乙酸为6：3：1)灌流固定，摘除动脉，取中心部横 Wistar系雄性大 鼠(12周，220g一250g)苯 巴比妥钠 断，长2niln，共5段。制成石蜡切片。用相关抗体 (表 1)按 (0．8ms／kg，腹腔注射)麻醉下，显露右颈内、外动脉分支部 ， SBC法行免疫染色。常规DAB显色。各时点5只动物。组织 2Fr球囊导管 (BaxterHealhtcareCo．，美国)从右颈外动脉向