以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉内皮细胞构建实验性角膜后板层.pdfVIP

· 1288 · ChineseJournalofPathovhvsiologv 2013，29(7)：1288．1293 [文章编号] 1000-4718(2013)07-1288-06 以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉 内皮细胞 构建实验性角膜后板层 祁 冰 ， 侯光辉 ， 李 柳 ， 季青山。， 吴 静 ， 周 清 (暨南大学附属第三医院，珠海市人民医院眼科，广东 珠海 519000；南昌大学附属第三医院，南昌市第一医院眼科， 江西 南昌330038；暨南大学附属第一医院眼科，广东 广州510630；暨南大学医学院眼科研究室，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：探讨以异种后弹力膜／基质为载体诱导人脐静脉内皮细胞向角膜内皮细胞分化的可行性及 移植术后在活体的生理功能。方法：体外分离培养脐静脉内皮细胞作为诱导移植的种子细胞；取当地质检合格的 猪眼球以直径6．2rain、厚 100 m、冷冻脱水进行角膜深板层载体的制备；接种经 CM-DiI荧光标记的第2～3代人 脐静脉内皮细胞于载体的后弹力层面，体外培养7—10d行细胞形态、密度、组织学和扫描电镜观察，待细胞与后弹 力层面融合形成单层后，用于兔角膜移植。受眼：正常健康新西兰大白兔24只(24眼)，实验组(人脐静脉 内皮细 胞移植组)12眼，对照组(单纯猪角膜深板层移植组)12眼，全角膜范围去除术眼内皮细胞 ，实施移植手术。结果： 人脐静脉内皮细胞在猪后弹力膜／基质载体上贴附生长，形成紧密连接的单层，形态近似六角形，呈铺路石状分布， 具有正常兔角膜内皮细胞的超微结构。术后8周实验组角膜基本透明，周边角膜略有水肿。对照组单纯猪角膜深 板层移植后，移植角膜明显水肿、混浊。结论：以异种角膜后弹力膜／基质为载体培养的人脐静脉内皮细胞，行异种 异体移植后，能够在活体上成活，并能维持角膜透明，具有正常角膜内皮细胞的生物学功能。深板层角膜内皮移植 术是体外培养血管内皮细胞移植的一种有效术式。 [关键词] 人脐静脉内皮细胞 ；猪角膜脱细胞基质；角膜内皮细胞 ；移植 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．加13．07．025 Decellularized porcine cornealposterior lamellae ascarriermatrix for cultivatinghumanumbilicalvein endothelialcelIs／nvitro QIBing，HOUGuang—hui，LILiu，JIQing—shan，WUJing4，ZHOUQing3 (DepartmentofOphthalmology，PeoplesHospitalofZhuhaiCity，TheThird48iti~dHospitalofJinanU,~verstiy，Zhuhai 519000，China；DepartmentofOphthatmoolyg，TheFirstHosptialofNanchangCity，TheThirdAffdiatedHospitalofNan- changUniverstiy，Nanchang330038，China；DepartmentofOphthalmoloyg，TheFirst~ tiatedHosptialof如 nUniversi- ty，Guangzhou510630，hCina；InstituteofOphthalmoloyg，SchoolofMedicine，JinanUniversity， 510632， hC ina．E·mail：HouguanghuiS02@qq．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethefeasibilityofcoillealposteriorlamellarreconstructionwithhumanumbili— calveinendothelialcells(HUVECs)nadporcinecorneaacellularmatrixinvitro，andtoobservethephy