重组腺相关病毒介导的VLDLR基因转移改善2型糖尿病大鼠大脑海马tau蛋白Alzheimer病样改变术.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalof ： !三2；箜=兰Q · 245 · [文章编号】 1000-4718(2010)02—0245—06 重组腺相关病毒介导的VLDLR基因转移改善 2型糖 尿病大 鼠大脑海马 tau蛋 白Alzheimer病样改变 杨 雁， 孙婷婷， 徐永平， 张建华， 张木勋， 张晓洁， 刘永健， 袁 刚 (华中科技大学同济医学院附属同济医院内分泌科，湖北 武汉430030) [摘 要] 目的：Tau蛋 白过度磷酸化是 Alzheimer病 (AD)的重要特征，在 2型糖尿病中tna蛋 白呈AD样过 度磷酸化改变。本研究运用极低密度脂蛋 白受体 (VLDLR)基因转移干预2型糖尿病大鼠(T2DM)，观察海马tna 蛋白磷酸化修饰水平的变化。方法：将8周龄雄性 Wistar大鼠随机分为3组，正常对照组 (CTL)以普通饮食喂养， 2型糖尿病组(T2DM)及 2型糖尿病处理组 (T2DM+VLDLR)。葡萄糖氧化酶法检测血浆血糖 ，放免法检测血浆胰 岛素，Westernblotting分析海马内总tau、tau蛋白上部分位点磷酸化及VLDLR水平。[一 P]标记的ATP和特异 性底物肽检测海马内胰岛素信号转导系统中的关键酶糖原合成酶激酶 一3p(GSK一3p)活性。结果：T2DM组大 鼠 经VLDLR基因处理之后 (T2DM+VLDLR)与对照组 (CTL)海马回总 tau蛋 白水平无差异 ，T2DM组 tau(pS214)、 tau(pS396)、tau(pS422)及 tau(pSpS199／202)位点上的磷酸化水平显著高于CTL组，而在 tau一1位点免疫反应显 著弱于CTL组；运用 VLDLR基因处理之后，tau蛋白上 tau(pT217)、tau(pS396)及 tau(pSpS199／202)位点磷酸化 水平显著下降，tau—l位点显著增强，但 tau(pS214)及 tau(pS422)位点磷酸化水平无显著下降。免疫组化结果检 测到T2DM组大鼠海马区tau蛋白在Ser214位点上磷酸化程度较CTL组显著增高，运用VLDLR基因处理之后，tau 蛋白磷酸化程度逆转不明显。3组大鼠海马细胞内总GSK一3B无显著差异，但T2DM组GSK一3p磷酸化程度显著 下降，运用VLDLR基因处理后GSK一3B磷酸化程度显著上升。结论：重组腺相关病毒介导的VLDLR基因处理可能 是通过抑制GSK一3B活性来改善 2型糖尿病大鼠海马 tna 蛋 白上部分位点的Alzheimer病样过度磷酸化状态。 [关键词] 受体，极低密度脂蛋白；糖尿病，非胰岛素依赖型；阿尔茨海默病；tau蛋白质类；糖原合成激酶38 [中图分类号] R587．1 [文献标识码] A rAAV —mediatedVLDLR genetransfectionreducestauhyperphOsphOry— lation inhippocampusoftype2 diabeticrats YANG Yan，SUN Ting—ting，XU Yong—ping，ZHANG Jian—hua，ZHANG Mu—xun， ZHANGXiao—jie，LIUYong—jian，YUANGang (DepartmentofEndocrinology，TongfiHospital，Ton iMedicalCollege，HtmzhongUniversityofScienceand Technology， Wuhan430030，China．E—mail：yuangang88@hotmail．eom) [ABSTRACT] AIM ：AbnormalhyperphosphorylationoftauplaysacriticalroleinthepathogenesisofAlzheimers disease(AD)，andtauproteinwashyperphosphorylatedintype2diabetes．Thepresentstudywasdesignedtoexplorehte phosphorylationleveloftauinhippoeampusoftype2di