转录因子GATA2在TNF-α介导的炎症反应中调节Tie2基因的表达.pdfVIP

· 1198· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(6)：1198—1202 [文章编号] 1000—4718(2010)06—1198—05 转录因子 GATA2在 TNF—o介【导的炎症 反应 中调节 Tie2基因的表达爿： 徐 令 ， 陈 小 ， 赖文玉 ， 伍 俊 (中山大学附属第二医院 医学研究中心，儿科 ，广东 广州510120) [摘 要] 目的：探讨在炎症刺激因子肿瘤坏死因子一d(TNF— )介导的炎症反应中转录因子 GATA家族 成员是否参与了Tie2基因的转录调控。方法：采用实时定量 PCR测定 TNF一仅作用前后人主动脉内皮细胞 (HAECs)和肺动脉内皮细胞(HPAECs)中GATA家族成员 GATA2、GATA3mRNA的表达，利用荧光素酶活性检测 研究GATA转录因子能否激活Te／2基因启动子，并采用电泳迁移变动分析(EMSAs)和超级迁移率变动试验 (super- shift)研究GATA转录因子是否通过与T／e2基因启动子结合，从而激活 T／e2基因的表达。结果：TNF—Ot可诱导人 血管内皮细胞 HAECs和HPAECs中转录因子GATA2的表达 ，高表达的GATA2可与 T／e2基因启动子上的(T／A) GATA(A／G)序列结合 ，激活T／e2基因启动子 ，从而上调 T／e2基因的表达。结论：GATA转录因子家族成员 GATA2 在 TNF— 介导的炎症反应中调节了Te／2基因的表达。 [关键词] 肿瘤坏死因子；基因，Te／2；转录因子 GATA2 [中图分类号] R392．31 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．06．030 Transcription factor GATA2 regulatesthe expression ofTie2 gene in TNF —o【mediatedinflammatoryresponse XULing ，CHEN Xiao ，LAIWen—yu ，WU Jun (CenterofMedicalResearch，DepartmentofPediatrics，TheSecondAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guang- zhou510120，China．E—mail：luoxu164@yahoo．con) lABSTRACTlAIM：ToexplorethepossibilitythatthetranscriptionfactorGATAfamilymemberisinvolvedinthe regulationofTie2geneexpressioninthetumornecrosisfactor—Ot(TNF一 )mediatedinflmamatoryresponse．METH- ODS：ThemRNA expressionofGATAfma ilymemhe~ GATA2nadGATA3wasdeterminedinprimaryhumanaorticendo- thelialcells(HAECs)andprimaryhumanpulmonaryarteryendothelialcells(HPAECs)beforeandafterTNF—atreat． mentbyreal—timequantitativePCR．TheactivationofT／e2genepromoterbyGATA trnascriptionfactorwasdetectedby luciferaseassay．Theelectrophoreticmobilityshiftassays(EMSAs)andsupershiftassaywereperfomredforverifying whetherT／e2geneexpressionwasactivatedbythebindingofGATA factorstoT／e2promoter．RESULTS：TNF一仅 in- crease