自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤在H2O2引起的神经胶质瘤U251细胞损伤中的作用.pdfVIP

国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(4)：695—698 · 695 · [文章编号] 1000—4718(2011)04—0695—40 自噬抑制剂 3一甲基腺嘌呤在 H2O2引起的 神经胶质瘤 U251细胞损伤 中的作用 孔晓霞 ， 张宏宇 ， 钟加滕 ， 康劲松。， 孙连坤 (温州医学院机能实验教学中心，浙江 温州 325035；吉林大学白求恩医学院病理生理学系，吉林 长春 130021) [摘 要] 目的：探讨 自噬抑制剂3一甲基腺嘌呤(3一MA)在H：0：诱导的神经胶质瘤U251细胞损伤过程 中的作用。方法：实验分为4组：正常对照组、10mmol／L3一MA组、1mmol／LH2O2组 、1mmol／LH2O2+10mmol／ L3一MA组。MTT法检测各组的U251细胞增殖率；MDC染色检测细胞 自噬空泡的变化 ；Hoechst33342染色检测 细胞核染色质凝聚变化；流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：与对照组相比，单独应用3一MA对U251细胞无明显 影响。HO：作用组 U251细胞增殖率明显降低 ，细胞内出现 自噬空泡，细胞核染色质凝聚，细胞凋亡率增加。3一 MA与HO 联合作用于U251细胞时，与单独应用 HO：组相比，抑制了H：O：引起的胞内自噬空泡的积聚，但细胞 凋亡率明显增加。结论：自噬抑制剂3一MA能够一定程度地抑制H：0：诱导的U251细胞 自噬，但促进了细胞凋 亡，表明自噬在HO 诱导的神经胶质瘤 U251细胞损伤过程中很可能起到保护性作用。 [关键词] 自吞噬作用；U251细胞；3一甲基腺嘌呤；过氧化氢 [中图分类号] R730．23 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．40．014 Roleofautophagyinhibitor3——methyladenineintheinjuryofU251cells inducedbyH，O， KONGXiao—xia，ZHANG Hong—yu ，ZH0NGJia—teng，KANG Jin—song ，SUN Lian—kun (TeachingCenterofFunctionalExperiment，WenzhouMedicalSchool，Wenzhou325035，China；DepartmentofPatho— physiology，NormanBethuncSchoolofMedicalSciences，JilinUniversity，Changchun130021，China．E—mail：sunlk@ H．edu．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheroleofautophagyinhibitor3一methyladenine(3一MA)intheinjuryof U251gliomacellsinducedbyH2O2．METHODS：Thefollowinggroupsinthisstudyweresetup：controlgroup，10 mmolZL3一MA group，1mmol／LH202groupand1mmol／L H202+10 mmol／L3一MA group．TheviabilityofU251 cellsineachgroupwasdetectedbyMTTassay．AutophagicvacuolesinthecellswereobservedbystainingwithMDC．The cellswerestainedwithHoechst33342todeterminethechromatincondensation CellapoptoticratioWas measuredbyflow cytometryanalysis．RESULTS：Comparedwithcontrolgroup，noeffectof3一MA ontheviabilityofU251cellswasob— served．InH2O2group，thecellviabilitydecreasedandcellap