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山药中尿囊素的高效液相色谱分析方法研究 周心如 曹京宜* 北（京化工大学应用化学系 分析中心 北京 100029） 提要 建立了山药中尿囊素的高效液相色谱分析方法。样品用甲醇-水9（0∶10，V/V 提取，在氨基柱上 进行高效液相色谱分析，紫外检测波长224nm流动相为甲醇-水8（0∶20，V/V）。相对标准偏差为2.% （n?5尿囊素的回收率为98.8％ィ╪n＝4 关键词 高效液相色谱法，尿囊素，山药 2.3 实验方法 1 前言 标准曲线制作：准确称取尿囊素标准品，用 山药有补脾健胃作用，近代药理研究表明，山药 50℃的二次蒸馏水溶解，配成约1mg/mL的标准品 还有调节、增强免疫功能和抗肿瘤及降压、防治心血 储备液。实验前以蒸馏水稀释配制0.1mg/mL及 管疾病和抗衰老作用。山药中所含的尿囊素具有抗 0.008mg/mL的标准液，储备液在冰箱中冷藏保存。 刺激物、麻醉镇痛、促进上皮生长、消炎抑菌作用，尿 准确吸取0.008mg/mL的标准液2468μ进样， 囊素的含量可作为含山药的中药制剂的质量控制标 记录色谱图，以峰高对进样量作图得通过原点的直 准。较早的文献1]报道中草药中尿囊素的测定是采 线 。 用薄层色谱法和分光光度法，操作复杂，定量不够准 24 尿囊素的定性鉴定 确。尿囊素的高效液相色谱法 H（PLC┎测定[25]，未 在不同的色谱体系下，用保留时间对照法和标 见用于测定山药药材。我们曾采用ODS柱测定了山 准追加法确定尿囊素峰的位置。在ODS柱上以甲醇 药及含山药冲剂中尿囊素的含量[6]，本文提出的采 氯仿-水 0（.5∶0.012∶100）为流动相；在NH2基柱 用氨基柱测定方法比前述柱系统稳定性更好，操作 上以乙腈-水 7（0∶30和 甲醇-水 8（0 ∶20为流动 更简便。 相。山药中尿囊素峰位置与标准品中尿囊素峰位置 相同。 2 实验部分 2.5样品预处理及测定 2.1仪器和试剂 在 10mL干燥的容量瓶中，准确称取粉状山药 样品约50mg，加入纯水1mL润湿，超声处理5min。 LC-6A高效液相色谱仪 岛（津）SPD-6AV紫外 加入甲醇约7mL，于室温超声处理20min。用甲醇稀 可见分光光度检测器 岛（津）。 释至刻度，充分振荡，放置 0.5h，沉淀糖类、蛋白质 甲醇，优级纯 北（京化工厂）；二次蒸馏水；SEP- 等。以2000r/min离心5min，取出上层清液，按下两 PAKC18小柱 密（理博公司）；尿囊素标准品、山药样 法之一操作：①直接稀释制备样品溶液。准确吸取 品 水（煮醇沉干燥固形物）均为北京中医药大学提 供。 0.4mL清液于10mL量瓶中，用50％甲醇定容。② 2.2色谱条件 通过SEP-PAKC18小柱净化。准确吸取0.2mL清液 加于SEP-PAKC18小柱中 小（柱预先用2.5mL甲醇 色谱柱为 Shim-Pac