乳腺增生组织蛋白质组凝胶内差异显示电泳分析.pdfVIP

_． 现代生物医学进 2O06 V01 ． 6 No．1O 乳腺增生组织蛋白质组的凝胶内差异显示电泳分析 卢德赵 沃兴德 沃立科 唐利华 李 毅 楼丽华2 赵 虹 (1浙江中医药大学生命科学学院 浙江杭州310053 2浙江省中医院乳腺病中心 浙江 杭州310006) 摘要 目的：建立具有高分辨率和稳定性的乳腺增生组织蛋白质组的双向电泳图谱，并对其进行差异蛋白质组分析。方法： 取乳腺增生病患者增生部位及正常部位乳腺组织，匀浆提取乳腺组织总蛋白，分别用c3或C 标记，每一对c3和C 标记样 品都与一个cy2标记的内标等量混合，上样于同一胶中进行电泳分离，经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所 获得的图谱经DeCyder软件进行分析。结果：在乳腺增生病增生的组织中，有 12个蛋白质表达水平显著增加，另外3个蛋白质 表达水平显著下降。结论：利用DIGE技术可以作胶内时比分析，也可以根据内标消除胶与胶之问的差异，提高统计的可信度 ； 分析所得的l5个差异蛋白质可能与乳腺增生疾病的发生与发展有关。 关键词：乳腺增生；蛋白质组；凝胶 内差异显示电泳 中图分类号：R271．44 文献标识码：A Proteomesutdyofhyperplasiaofmanunaryglands bytwo—dimensionaldifrerencegelelectrophoresis ￡ De—Ztmo ，踟 Xing—de ，WOLi一肫 ，TANGlJ—hua ，11Yi，LOULi—hua ，ZHAOHong (1． of Science，ZheiiangChineseMedicalwtiversity，Hangzhou310053，china； 2ResearchcenterofManmu~ g~,td，ZhejianghospitalofTraditionalChinesemedicine， u，310006) AB rRACTObjective：Toestahfishandnaalysisnmpsoftwo—dimensionaldifferencegelelectmphoresisforpmteomicstudyofhyperplasia ofmmnmaryglands，Methods：Normalntagu~ glaJ1dsandsurgicallyresectedhyperplasiaofmatlanalffglandsconstitutionwerehomogenized withlysissolution，TheextractswerelabeledwithCy3orCy5rnadomly．EachCy3一labeledsamplemtdCy5一labelde sampleweremixde onthe SaIll~2一Dgelalongwithacy2一labeledmixtureofallsaIllplesasna internalstandard．Thegdswererespectivelyimagde byTyphoon9400us’ ingdifferentemission61ternadspot—featureswerenaalyzedbyDeCydersof3w．are ineachpairde normal／diseaseCOlllpan~)n．Result：12unique proteinsthatwerec}mngingina．bm~dm)cemorel})na 1．4folderupw}file3proteinsdecreasednloretiatn1．4folderdownbetweennormalmammary glnadsandsurgicallyresectde hyperplasiaofmanmmryglandscomtitution，Conclusions：usingDIGE technologywithinternalstandard，statisti· callysigrfific