脉络瘀滞型血管性痴呆动物模型研制的实验研究.pdfVIP

华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 237 脂组按同样剂量灌胃纯净水，连续灌胃15天，高脂组待血脂升高后方可进行造模。 加至lOOml的比例配制。先将猪：油加热熔化，后加入胆固醇溶化，N：DH入胆酸钠和甲基硫氧嘧啶，充分搅 匀，最后放入吐温-so、丙二醇和蒸馏水，不断搅拌待全溶后冷却至室温，放入4。c的冰箱保存。用时加温只 37。C。 1．4建立模型 造模两组动物称重标记后按3．5mg／kg腹腔注射3％戊巴比妥钠进行麻醉，常规固定消毒，小心游离双侧 术后10天存活有显著学习记忆障碍的大鼠分别为单纯缺血再灌注模型和脉络瘀滞合并再灌注血管性痴呆 模型。正常假手术组只切开而不做缺血手术。除去淘汰的不合格鼠及手术死亡的动物，每组15只动物进行 实验研究。 1．5学习记忆行为的检测 1．5．1定位航行测试将待测大鼠头朝池壁放入Morris水迷宫其中一个象限，记录大鼠找到水下平台的时 鼠移开并擦干。每只大鼠每天训练4次，两次问隔20min，连续5天。第6天测试，记录逃避潜伏期(即大鼠 从水中到找到平台后四肢爬上站台所需时问)、有效区停留时间及总路程等作为定位航行的检测指标。 1．5．2空间搜索测试定位航行测试后的第二天，将平台撤除，开O台120S的探查测试。将大鼠由原先平台 象限的对侧放入水中，记录大鼠穿越虚拟平台的次数，有效区停留时间，有效区停留距离等作为空问记忆 的检测指标。 理盐水制备10％匀浆，离心取上：清液，严格按试剂盒说明进行AchE活。陛禾HMDA含量测定。 2．结果 2．1定位航行测试结果 一 表l定位航行测试结果(X±S) 注：与正常组相比“P0．05；与单纯脑缺血再灌注模型组比6P0．05 大鼠定位航行的实验结果：由表1可以看出高脂+脑缺血再灌注模型组和单纯脑缺血再灌注模型组在逃 避潜伏期时间及总路程同正常假手术组间均存在显著差异(P0．05)；且高脂+脑缺血再灌注模型组在逃 避潜伏期及总路程同单纯脑缺血再灌注模型组问均存在显著差异(I，0．05)；在有效区停留时间上各组 并没有显著性差异(P0．05) 238 华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 2．2空间搜索测试结果 表2空间搜索测试结果(x±S) 注：与正常组相比“P0．05；与单纯脑缺血再灌注模型组比6P0．05 大鼠空间搜索测试结果：高脂+脑缺血再灌注模型组和单纯脑缺血再灌注模型组在穿越平台次数 缺血再灌注模型组较单纯脑缺血再灌注模型组在穿越平台次数(／2minl)亦存在显著差异(P0．05)。 2．3AchE、SOD活性和blDA含量检测结果 一 表3各组大鼠AchE、SOD}N性和MDA含量变化(X±S) 注：与正常组相比“P0．05；与单纯脑缺血再灌注模型组比6P0．05 3．讨论 有关血管性痴呆的动物模型研究非常多，主要有M受体阻断剂东莨菪碱致动物学习记忆障碍模型， 兴奋性氨基酸基底前脑注射致动物学习记忆障碍模型，正常老年动物模型，颈总动脉缺血再灌注模型 以及转基因动物模型等晗1。其中以双侧颈总动脉缺血合并再灌注动物模型在现代实验研究中应用最为 广泛。 VD是迄今为止唯一可防治的痴呆，如早期治疗会具有可逆性。近年来，随着中医对VD研究的广泛 开展和深入，借助动物模型来进行VD发病机制及疗效方法的研究已越来越成为一种手段。由于动物模 型不能全面反映VD的发病机理，现在多从某一方面或几方面着手造模。如何研制比较接近VD临床发病 病因及证候的动物模型是我们今后努力的方向。中医理论认为痴呆的病因病机在于老年脏腑虚衰，肾 精亏虚，脑髓不充，痰瘀阻络。 《血证论》日： “血在上，则浊蔽而不明矣”，痰瘀浊气杂于脑髓， 使清窍不清，元神失养，而灵机记性．皆失，出现神志迟钝，遇事善忘等症状。肾精亏虚，痰瘀互结， 阻滞脉络是VD发生的基础；痰瘀蕴积，酿生浊毒，败坏脑络脑髓，是导致VD发生发展的关键。据此我 们在中医理论的基础上，根据老年人的发病特点，在给大鼠灌胃脂肪乳一段时间待其血脂升高的基础 上合并脑反复缺血再灌注初步建立了脉络瘀滞型VD动物模型。这一造模方法既符合血管性痴呆脑组织 缺血缺氧的病理变化，同时也符合中医脉络瘀滞的病因。 Morris水迷宫是目前评价动物学习记