慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞及激活亚群与基因型的分析.pdfVIP

第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 二、基因分型的检测 HLA-DR＋CD8＋/CD8＋）。分析前流式细胞仪处于 [5] TM 采用 PCR 微量板核酸杂交酶联免疫法 。 正 常 工 作 状 态 ， 且 应 用 Flow-Check 三、血清 HBeAg 含量的检测 Fluoropheres （美国Beckman Coulter 公司）检测 取肘静脉血 2 ml ，分离血清，化学发光法检 光路流路。同时全血标本上 CD3200 血细胞计数 测患者 HBeAg 含量，HBeAg 含量≤1 PEIU/ml 仪（美国雅培公司）进行血细胞计数分析，得出 为 HBeAg 阴性；＞1PEIU/ml 为 HBeAg 为阳性。 淋巴细胞绝对值。用淋巴细胞绝对值乘以各亚群 仪器为美国雅培公司生产的 ARCHITECT 细胞百分率，得出各亚群细胞绝对数。 i2000SR 化学发光仪，试剂均为配套试剂。 五、统计学分析 4 ．外周血T 淋巴细胞及激活亚群的表达 测得数据用x ±s 表示，采用 SPSS13.0 统计 取肘静脉血 2ml ，EDTA-K2 抗凝，充分混匀 软件进行分析，均数间的比较采用独立样本 t 检 后 送 检 。 取 6 支 试 管 ， 分 别 加 验。 IgG1-FITC/IgG1-PE/IgG1-PC5 、CD -FITC/CD - 4 8 PE/CD -PC5 、IgG1-FITC/IgG1-PE 、CD -FITC/ 结 果 3 3 HLA-DR-PE 、CD -FITC/HLA-DR-PE、CD -FITC/ 一、CHB 患者外周血 T 淋巴细胞亚群的表 4 8 HLA-DR-PE 荧光素标记单克隆抗体各 20µl ，每 达 管加 100μl 抗凝全血后混匀避光反应 15min，在 175 例 CHB 患者外周血 T 淋巴细胞亚群的 Q-PREP 标本处理器（美国 Beckman Coulter 公 表达，见表 3 。经统计分析：B 型 HBeAg （＋） 司）上溶血、固定、混匀，上流式细胞仪分析 T 组与 C 型 HBeAg （- ）组和 C 型 HBeAg （＋） （CD3＋）细胞、CD4 ＋ （CD3＋CD4＋）T 细胞、CD8 组间 CD8 细胞百分比比较，差异均有统计学意 ＋ （CD3＋CD8＋）T 细胞及其激活亚群（HLA-DR 义（t ＝2.26 和 t ＝2.69 ，P 值均＜0.05 ）。四组间 ＋ CD3 ＋ /CD3 ＋ 、HLA-DR ＋ CD4 ＋ /CD4 ＋ 和 淋巴细胞数、CD3 和 CD4 差异均无统计学意义。 表 3 不同组别 CHB 患者外周血 T 淋巴细胞亚群分布（x ±s ） 基因分型 HBeAg 例数 淋巴细胞数 CD3 （% ） CD4 （% ） CD8 （% ） B 型 - 46