腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2基因转移促进人间充质干细胞成骨化.pdfVIP

维普资讯 孙志波等．腺病毒介导的骨形态发生蛋E3-2基因转移促进人间充质干细胞成骨化 ·l99 · 腺病毒介导的骨形态发生蛋白一2基因转移促进 人间充质干细胞成骨化 孙志波 ， 杨述华 ， 禹志宏 ¨， 王家宁 邹海兵 ， 张 磊 (华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科，湖北 武汉 430000； 郧阳医学院附属人民医院 创伤骨科 ；临床医学研究所 ，湖北 十堰 442000) [摘 要】 目的：观察腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因转移对人间充质干细胞(hMSCs)成骨能力的 影响。方法：从健康志愿者全骨髓中分离培养hMSCs，体外扩增纯化后随机分为4组。(1)Ad．BMP-2组：培养液中 加入BMP-2基因重组腺病毒(Ad-BMP-2，1X10OPU／mL)孵育24h；(2)Ad-LacZ组：培养液中加入半乳糖酐酶基 因重组腺病毒(Ad-LacZ)；(3)阳性对照组：培养液中添加地塞米松、抗坏血酸和B-甘油磷酸钠。(4)空白对照组。 2W后行VnaKossa染色检测hMSCs中骨胶原结节形成；生化分析仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性。结果：经多次换 液传代，hMSCs呈均一梭形。Ad-BMP-2组与阳性对照组细胞形态逐渐趋于扁平，突起减少 ，Vna Kossa染可见大量 红色骨胶原结节形成，APL 活性也显著增高。结论 ：Ad-BMP-2基因转染对 hMSCs成骨能力具有促进作用。 [关键词】 间充质干细胞；骨形态发生蛋白；腺病毒；基因转移；骨生成 [中图法分类号】 R253 [文献标识码】 A [文章编号】 1006．9674(2008)02-0199-03 AdenovirusM ediated BoneMorphogenetlcProtein2GeneTransferPromotesHuman OsteogenesisofMesenchy- malStem Cells SUN Zhi．bo ，YANG Shu．hua ，YUZhi．hong2 ‘WANGJia．ning ，ZOU Ha1．bing2ZHANG Lei ， ， (DepartmentofOrthopaedics，UnionHospital，Ton~iMedicalCollege，HuazhongScienceandTechnologyUniversity，Wuhan， Hubei430000；DepartmentofTraumaticOrthopaedics；InstituteofClinicalMedical，RenminHospiatl，YunyangMedcialCol— lege，Shiyan，Hubei442000，China) Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectofadenovirusmediatedbonemorphogeneticprotein2 (Ad-BMP-2)gene transferonhumanosteogenesisofmesenchymalstemcells(hMSCs)．MethodshMSCswereisolatedfromhealthyvolun- tcers，culturedna dpurifiedinvitro，andrandomlydividedinto4groups．InAd-BMP-2group，BMP-2recombinantadenovi- rus(Ad-BMP-2)WaSaddde intocu