丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）抑制剂对人精子活动力的影响.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2011Feb；27(2)：291—2 ·2‘91· 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)抑制剂对人精子活动力的影响 丁玉芹，姜 宏，汪存利 (安徽 医科大学解放军临床学院生殖医学中心，安徽 合肥 230031) EffectOfM APK inhibitoronhumansperm motility 育1h后，Malker精子计数板检测各组精子活动力。 DINGYu-qin，JIANG Hong，WANGCun-li 1．2．2 作用时间对精子活力的影响 将正常组和弱精症组 (ReproductiveMedicineCenter，the105thHospitalofPLA，Anhui 精液样本按每孔 100 l接种于96孑L细胞培养板中，分别加 MedwalUniversity，~eifei230031，China) 入浓度实验中对精子活动力影响最佳浓度的PD98059，分为 中国图书分类号：R321．1；R345．57；R698．2；R977．3 空 白对照组、80p~mol·L PD98059组 和 60Ixmol·L 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2011)02—0291—02 SB203580组，置37℃、5％ CO2培养箱内分别温育 10、2O、 关键词：精子活动力 ；细胞外信号调节激酶(ERK)；p38丝裂 40、60min，观察PD98059和SB203580干预不 同时间精子活 原激活蛋 白激酶 (p38MAPK)；PD98059；SB203580；免疫印 动力的变化。每个时间点均设3个复孔取其平均值，收集精 迹技术 子，储存于一196~C液氮中备用。 Key words：sperm motility；ERK；p38 MAPK；PD98059； 1．3 ERK和p3s磷酸化和蛋白表达水平测定 取出精子 SB203580；Westernblot 沉淀 ，用Wseternblot检测技术检测ERK和p38磷酸化和蛋 白表达水平，QuantityOne分析软件分析条带灰度值。 1．4 统计学方法 应用 SPSS11．5统计软件，各组间的差 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)属于丝／苏氨酸蛋 白激 酶，有报道…其家族成员细胞外信号调节激酶 (extraeellular． 异性比较采用两组独立样本的t检验。 signalregulatedproteinkinase，ERK)和p38MAPK定位于精子 2 结果 尾部 中段 ，参与精子活动力 的调节；17一B雌二醇可通过 2．1 不同浓度的PD98059和SB203580对精子活动力的影 P13K／Akt通路激活 ERK，增加精子活动力，并且 ERK是在 响 正常精子活动力随PD98059浓度的增加逐渐下降，80 ~xmol·L 的PD98059对精子活动力的抑制程度最大；加入 精子由静止状态转变为运动过程中逐渐被活化的，抑制内源 性ERK可以使精子鞭毛活力下降 。J。从理论上讲，增加 SB203580后弱精症患者精子活动力逐渐增加 ，浓度60 m0l · L 时精子活动力升高最为明显。 或降低ERK和p38的活性可调节精子活动力。鉴于此 ，我 们以ERK和p38信号转导通路特异性抑制剂 PD98059和 2．2 PD98059和 SB203580作用时间对精子活动力的影响 SB203580作用于精子细胞，旨在探讨 PD98059和SB203580 随着PD98059作用时间的延长，精子活动力逐渐下降，作 用40min精子活动力最低 ；而SB203580作用 10min后 ，精