诱导多潜能性干细胞的研究进展.pdfVIP

第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 干细胞(Stem Cell)是既有自我更新和不断增殖的能力，又有多向分化潜能的原始细胞， 主要分为胚胎干细胞(Embryonic stem cells, ESCs)和成体干细胞（Adult Stem Cell ）。理论上前 者可以分化为各种组织细胞，但涉及伦理学、细胞来源、法律等方面的问题，限制了其研究 和应用。后者可以从成体组织获得，但其再生和发展的能力有限，只能分化为相应组织细胞。 因此，科学家们一直试图寻找能将已分化体细胞重新编程恢复全能性的方法，将已分化的体 细胞直接转化为诱导性多潜能干细胞，从而避免伦理、免疫排斥等方面的问题。2006 年日 本京都大学Yamanaka从与小鼠胚胎干细胞增生分化的 24 个候选因子中筛选出Oct4、Sox2、 [1] c-Myc、Klf4 等 4 个转录因子将小鼠成纤维细胞诱导为ES类似的细胞，将其命名为iPS细胞 。 iPSCs具有类似ESC 的功能，可用于临床疾病的治疗，已成为干细胞及再生医学研究领域的 热点问题，具有十分广阔的应用前景。因此，各国科学家对iPSCs 的研究便如火如荼开展起 来。但iPSCs 的研究存在诱导效率低、安全性无法保证以及重编程机理尚未明了等问题，限 制了其在临床上的应用。本文就iPS研究的近期现状与临床应用前景进行综述与展望。 1 iPS 诱导效率的改进 [2]、人[3, 4]iPSCs成功获得诱导以来，科研人员尝试各种方法去提高诱导效率。 自从小鼠 从 4 因子到3 因子，从用更少的因子到不用转录因子和病毒参与的诱导方法。肖磊等[5]研究 发现，6 因子(Oct4, Sox2, c -Myc, Klf4, Nanog和Lin28)联合产生iPS细胞的效率比 4 因子提高 10 倍，并且产生iPSCs克隆的时间缩短了一半。邓宏魁等[6]发现p53 siRNA和UTF1 可以使 iPSCs产生的效率提高百倍，同时发现c-Myc基因的移除对iPSCs诱导效率影响不大。Yoshinori [7] [8] 等 发现低氧条件(5%)能够提高小鼠以及人类细胞的重编程效率。Lin等 利用ALK5 与MEK 的抑制剂(SB431542 与PD0325901)将人成纤维细胞诱导成iPSCs 的效率提高200 倍。Esteban 等[9]发现维生素C可以增强iPSCs 的诱导效率。iPSCs诱导方法的不断探索，使得iPSCs诱导效 率有了很大的提高，向更高效、更安全的方向迈进。但iPSCs是一个复杂的过程，受到诸多 因素的影响。首先，当有 1 到 4 种基因载体同时感染的细胞，并在有或无其他外源因子的共 同作用下，才有可能实现细胞重编程；其次，外源基因表达沉默过早，无法完成对细胞的重 编程，沉默过晚则可能引起细胞再分化或转化停滞不前。转染进入体细胞内的因子获得表达， 并能精确掌握由外源基因调控转化为内源基因调控时机，才能实现分化体细胞向iPSCs 的转 变。显然，能同时满足这两方面条件的细胞甚少，这可能是iPSCs诱导效率低下的主要原因 之一。除此之外，iPSCs诱导效率还受到培养系统、细胞类型、细胞转染起始量、筛选时间 和筛选方法等因素的影响。虽然现在iPS诱导效率上有了进一步的提高，但是总的重编程效 785 第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 率始终偏低，如何使其诱导效率从量变转换到质变，需要各国科学家进行一系列的深入研究。 2 iPSCs 诱导新方法 诱导性多能干细胞的应用前景非常具有诱惑力，但目前仍处于早期的探索阶段。要达到 临床应用的目标，必须改进现行iPSCs 的产生方法，提高诱导效率，并确保生成健康安全的 iPSCs 。早期多采用病毒载体携带外源转录因子进入细胞。但病毒载体和外源基因序列会永 久地整合入细胞的基因组中，引起插入突变以致干扰正常的iPS细胞系的功能。细胞中残余 外源因子序列的持续表达也会影响iPSCs 的分化，甚至导致肿瘤的发生，使得i