脑络欣通对脑缺血再灌注大鼠形态学及其皮质TNF-a、c-Myc蛋白表达影响的实验的研究.pdfVIP

如无法通过观察面色、表情、问诊和切脉来获得证的确切信息；某些目测的结果主观性强， 无法定量。故动物模型的症状观察有其特殊性，本研究采取以下措施，制定肾阴虚证动物模 型症状观察表(详见表3)。①将不能(或不便)在大鼠身上观察的辨证因子(如耳鸣、耳 聋、小便余沥不尽等)筛去。②将某些指标做适当修改，如五心烦热用烦躁不安、易咬人代 替，潮热用体温升高、午后为甚代替。③细化了某些观察指标，如对皮肤毛发的观察包括色 泽，有无脱毛，脱毛面积、部位，有无毛细血管充盈。④对于主观性较强的指标力求通过较 为客观的方法体现，吸收前人经验从试验的角度对模型的症状进行定性和定量：如临床虚证 病人耐力下降，病人常主诉无力，我们用自主活动次数、游泳时间代替，考察模型动物的自 主活动能力，说明动物是否有精神萎靡、懒动等表现；测量大鼠肛温，自身前后对照，并作 模型组与空白组的比较；测量大鼠饮水量，作统计分析。⑤增加了常被实验者忽略、却是肾 阴虚证重要辨证冈子的指标，如尿量尿色的变化情况。 表3 肾阴虚证动物模型症状观察表 临床肾阴虚主证 观察办法 模型症状 口燥咽干 饮水量 动物饮水增加 尿黄便干 肉眼 尿量减少，色黄，大便干结 形体消瘦 电子秤 体重增长缓慢，体重减轻 精神亢奋 行为学 不动，抓取时挣扎无力，活动灵敏，不易抓取， (应激状态下) 反抗，主动咬人 五心烦热 肉眼 烦躁币安，易咬人 潮热 电子体温计测量 体温升高，午后为甚 腰膝酸软无力 旷场试验 自丰活动能力下降。 性功能低下 生殖功能指标检测 生殖器官病理改变、母鼠怀孕率降低 本实验用上表列出的试验方法在模型大鼠身上观察了与肾阴虚证高度相关的辨证因 予。结果显示，在造模过程中，大鼠直肠温度升高，尿量较空白对照组大鼠也明显减少，大 便干结，多数大鼠出现毛松无光泽，枯槁发黄，背部脱毛、少数出现腹毛潮湿的现象；造模 中期大鼠被抓取时反应剧烈、挣扎有力，试图咬人；成模时自主活动能力下降，对低温的耐 受力也下降．生殖能力也有显著的降低，表现为：精子数量、质量、活动能力下降，精子畸 形率增加。综合以上试验结果，说明模型大鼠具备类似临床肾阴虚证的症状、体征，进一步 证明实验一和实验二的造模方法可行。 参考文献(略) 脑络欣通对脑缺血再灌注大鼠形态学及皮质TNF-a、c．Myc蛋白表达 影响的实验研究 170 胡建鹏王键郜峦吴玲 安徽中医学院(台肥230038) 国家中医药管理局基金资助项目(NO．2．03JPl8) 安徽省自然科学基金资助项目(NO 安徽省教育厅自然科学资金资助项目(NO．2005KJ274) 摘要目的探讨脑络欣通对气虚血瘀证脑缺血再灌注大鼠神经元．神经胶质细胞形态学变化 和TNF．a、e-Myc蛋白表达的影响。方法采用气虚血瘀证模型鼠，再线栓法犬脑中动脉阻 塞复制局部脑缺血再灌注模型，缺血2h分别再灌注ld，3d，7d，随机分为假手术组、模型组、 益气组，活血纽和脑络欣通组。应用光镜和免疫组化法，观察缺血侧额顶叶皮质神经元，神 经胶质细胞形态学变化及TNFa、c．Myc蛋白表达。结果气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注后， 同侧额顶叶皮质梗死区神经元、小胶质细胞，星形胶质细胞出现变性，死亡，梗死灶周围小 胶质细胞和星形胶质细胞增生，神经元、小胶质细胞、星形胶质细胞出现变性、死亡，呈现 时间相关性，变性、死亡以再灌注3d最为显著，星形胶质细胞和小胶质细胞增生以再灌注 最为显著。脑络欣通组TNF-a、e-Myc蛋白表达降低，与模型鼠比较在3d，7d时有显著r|生差 异(PO．05或P0．01)。益气组，活血组部分时段表达降低，与模型