绿液预处理对麦草化学成分及酶水解糖化的影响.pdfVIP

江苏省造纸学会第十一届学术年会论文集》 【生物质材料与能源卷】 1原料与方法 1．1原料 麦草经过风干后去根及穗，保留茎、叶、鞘，剪成3N5cln的草片，混合均匀后平衡水分备用。酶 FPU／mL)、木聚糖酶(NS50014，酶活850 水解液由纤维素酶(NS50013，酶活84 IU／mL)和户纤维二 糖酶(NCl88，酶活350 醋酸．醋酸钠缓冲液(pH值4．8)把纤维素酶、木聚糖酶和肛纤维二糖酶以酶活比为1：1．2：l配成的混 合酶液，混合酶液的酶活以纤维素酶滤纸酶活计为20FPU／mL，过量的户纤维二糖酶是为了防止酶水解 21。 过程中纤维二糖的积累【l 1．2绿液预处理 硫化度为0、20％、40％，固液比为1：6(聊力，在80℃下空转预浸30min后，以2℃／min的速率分别 升温至130、140和150℃，保温lh完成绿液预处理。经预处理的麦草用水洗净后离心脱水，在密封容 器中充分平衡水分后称质量，根据测定的水分计算浆料得率。预处理麦草再经盘磨机(1锄(，磨盘直径 300 000 mm，转速3r／min)疏解成浆，盘磨间距为0．04衄，重复磨两次后再经离心脱水、撕碎后平衡 水分以备酶水解使用。 1．3酶水解 精确称取相当于2 mL离心管中，加入一定量纤维素酶活为20 g绝干质量的预处理后浆料于50 FPU／mL的混合酶液。以每克绝干底物为基准，混合酶的用量分别为5和10 FPU／g，补充一定量的pH 值4．8的醋酸．醋酸钠缓冲液，调节酶水解底物浓度为5％，并加入O．04(W／V)的四环素作为抗生素， 防止糖化过程中微生物污染。将离心管置于恒温振荡器(DH独102)中，在180r／min、50℃下振荡酶 水解48h。酶水解结束后在5000r／min下离心15min，分离酶水解液，测定其中的糖含量。 1．4分析与检测 1．4．1原料成分分析麦草原料及预处理后浆料的苯—醇提取物、综纤维素、灰分的含量根据标准方法[13】 分析。木质素含量根据美国能源部【141的方法分析，同时测定木质素中的灰分含量，计算Klason木质素含 nln处的吸光度，计算酸溶木质素的含量【141。 IA．2原料、预处理后浆料酸水解液和酶水解液中含糖量分析取lmL原料或预处理后浆料4％H2S04 匀后用O．22 mill使 tun尼龙滤器过滤，取适量滤液至1．5mL样品瓶待进样。将酶水解液置于沸水浴中5 酶蛋白沉淀，离心后分离清液。取lmL清液稀释10倍后，用O．22tun尼龙滤器过滤至1．5mL进样瓶 1200)分析单 待进样。原料、预处理后浆料酸水解液和酶水解液均采用高效液相色谱(HPLC，Agilent Rad HPX．墙7H mmx7．8 糖量，分析柱为Bio Aminex 20n，300 mill，保护柱为Cation-HRefill Cartridges， mmol／L H2S04，流速为O．6mL／min，柱温55℃。检测器为 30ramx4．6mm，进样量为10¨L，流动相为5 luD示差检测器，外标法测定。文中所有单糖均转化为聚糖。 一l舻 ‘江苏省造纸学会第十一届学术年会论文集》 【生物质材料与能源卷】 注：总糖为葡聚糖、木聚糖和阿拉伯聚糖之和 表1所示为麦草原料中主要还原糖含量，表中葡聚糖、木聚糖和阿拉伯聚糖含量根