乙酰化莼菜多糖中单糖组分的GC-MS分析.pdfVIP

维普资讯 第 3O卷第 4期 武 汉 工 程 大 学 学 报 Vo1．30 No．4 2008年 O7月 J． Wuhan Inst． Tech． Ju1． 2008 文章编号 ：1674—2869(2OO8)O4—0036—03 乙酰化莼菜多糖中单糖组分的GC—MS分析 张 平，俞智熙 (武汉工程大学分析测试 中心，武汉 430074) 摘 要 ：采用乙醇沉淀法从莼菜 中提取多种多糖化合物 ，多糖化合物经水解 ，乙酰化后利用气相色谱一质谱法 分析，确定了莼菜单糖的组成．研究表明，该方法是一种高效分离和高灵敏度检测鉴定莼莱多糖组分中单糖 结构的定性定量方法． 关键词 ：莼菜 ；多糖 ；单糖 ；乙酰化 ；气相色谱一质谱 中图分类号：0658 文献标识码 ：A 厂 ，经湖北民族学院中药研究所监制 ，所有化学试 O 引 言 剂均为分析纯． 莼菜(BraseniaschreberJ．F．Gme1)系睡莲科 Nicoletimpact420付立叶变换红外光谱仪 植物 [1]，莼菜鲜样含水量高达 97．5 ，总糖含量为 (美国尼高力公司)；FinniganTraceGC—MS气相 0．86 ，其中主要是莼菜多糖 ，存在于莼菜茎叶上 色谱一质谱联用仪 (美国热电菲尼根质谱公司)． 的透明黏液质中． 1．2 实验方法 研究表明，从各种动植物 中提取 的多糖 具有 1．2．1 多糖化合物 的提取及 纯化方法 称取 抗肿瘤 、抗病毒、降血糖、抗菌消炎和促进免疫等 500g洗净晒干的莼菜 ，经过研磨后加入 1：1的乙 方面的生物功能[2叫]．一些多糖 已经制成药剂 ，用 醇一乙醚混合液，65℃水浴回流 3h去脂 ，残渣 中 于临床治疗和保健．无论是多糖产品的开发 ，还是 加水 ，9O～100℃水浴提取 3～5h，更换清水反复 多糖生物功能的研究，都要求对多糖 中单糖的组 提取 2～3次，合并深绿色多糖提取液，过滤，浓 成进行分析．由于多糖的结构相当复杂 ，国内外研 缩．向提取液 中加入 4倍体积的乙醇 、离心分离 ， 究者在多糖的分离提取纯化和结构分析方面已经 沉淀即为混合多糖粗品．用 Sevag法 除去多糖粗 做了不少工作 ，为了进一步开发和利用莼莱多糖 品中的蛋 白质 ，H。0。除去色素 ，浓缩 ，冻干 ，即得多 资源 ，我们进行了深入 的研究．由于单糖存在于植 糖纯品． 物果实 中且结构复杂 ，进行分离纯化 以及纯度鉴 1．2．2 多糖的水解 取多糖样品 15mg于安瓶 别较困难 ，因而必须寻求一种高效分离和高灵敏 中加入 4mol／L三氟乙酸 4mL，密封后在 120℃ 度检测鉴定多糖组分中单糖结构的气相色谱一质 恒温水解 5h，用 N 吹干三氟乙酸 ，加甲醇并吹干 ； 谱分析方法．由于糖类本身没有足够的挥发性，因 1．2．3 单糖的还原 水解产物加入 0．5mL、 此进行气相色谱分析时，必须先将其转化成易挥 0．05mol／LKOH 溶液 ，再加入 10mgKBH ，室 发 ，对热较稳定的衍生物．通常用的衍生化方法是 温下反应 6～8h，加少许 乙酸分解过量 KBH ，至 硅烷化或乙酰化．由于硅烷化会产生衍生物的异 无气泡产生为止．蒸干反应液，以酸性甲醇洗涤反 构体，在色谱图上出现多峰，给定性和定量带来困