电项针对大鼠脑缺血再灌注损伤后NCAM与Nestin表达的影响.pdfVIP

响.湖北中医学院学报,2006,8(4):3-5. [9] 刘 波 , 唐 强 , 李 静 . 针 刺 治 疗 缺 血 性 脑 损 伤 的 实 验 研 究 . 中 国 康 复 理 论 与 实 践,2005,11(7):514-515. [10]谭峰，莫新民.缺血性脑血管病血管新生的研究概况.湖南中医药大学学报，2007 ，4 （6 ）： 7-8. 电项针对大鼠脑缺血再灌注损伤后NCAM 和 Nestin 表达的影响 † 马睿杰 林咸明 陈晓军 （浙江中医药大学 310053 ） [摘 要] 目的：观察电项针对大鼠脑缺血再灌注损伤后 NCAM 和 Nestin 表达的 影响和变化规律，并与项针治疗作用进行对比，探讨电项针及项针治疗缺血性脑 损伤的作用机制。方法：采用改良的线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。 将 Wistar 雄性大鼠，随机分成 4 组：假手术组、模型组、电项针组、项针组(n=4) 。 各组随机分成 1d、3d、7d、14d 四个时间段，对大鼠进行实验观察：(1) 观察实 验各组大鼠不同时间点脑梗死体积测定；(2) 免疫组织化学技术检测大鼠神经细 胞黏附分子（NCAM ）、巢蛋白(Nestin)的表达变化及电项针、项针治疗对它们的 影响。结果：(1) 电项针和项针治疗可明显缩小脑梗死体积，与模型组比较有显 著性差异(P ＜0.05) ，其中电项针组与项针组比较亦有显著性差异(P ＜0.05) 。(3) 免疫组化结果显示：与模型组比较，电项针和项针治疗可明显提高室下带及海马 齿状回 NCAM 和 Nestin 表达水平。电项针组与同时间点项针组比较有显著性差 异(P ＜0.01 或 P ＜0.05) 。结论：(1) 电项针和项针治疗可能通过增强梗死周围血 液供应，减少梗死体积，达到改善神经功能的目的。(2) 电项针和项针治疗可通 过促进 NCAM 和 Nestin 的表达，诱导神经干细胞增殖、分化，促进神经功能恢 复，从而减少脑缺血再灌注损伤，促进神经功能恢复。 (3) 通过对照研究发现 电项针治疗在以上几方面均优于项针组，这可能与刺激强度及形成的电场作用有 † 通信作者：马睿杰，杭州市滨江区滨文路 548 号，310053，Email ：maria7878@ 电话 181 关。 [关键词] 脑缺血再灌注；电项针；NCAM ；Nestin 缺血性脑病是临床上常见的急性脑血管疾病。治疗的关键在于挽救缺血半暗 带濒临死亡的神经元和促进损伤后神经功能的恢复。项针在脑缺血急性期和后遗 症期的临床治疗取得了显著疗效，但对于项针的疗效的机理研究则刚刚开始。神 经细胞黏附分子（NCAM ）与神经突触可塑性及神经再生等关系密切，称为近年 研究的热点；而神经上皮干细胞样蛋白(Nestin)又称“巢蛋白”是一种中间丝蛋白， 被认为是中枢神经系统发育过程中神经干细胞或神经前体细胞的标志之一。本课 题从电项针干预内源性神经干细胞相关因子的研究入手，为项针治疗缺血性脑病 的机制研究开辟新的研究方向。 1 材料与方法 1.1 局灶性脑缺血再灌注动物模型的建立 成年健康雄性 SD 大鼠 96 只，质量 300±20 ｇ，清洁级，由浙江中医药大学实验动物中心提供。随机分成4 组：假手 术组、缺血再灌注模型组( 以下简称模型组) 、缺血再灌注加电项针治疗组( 以下简 称电项针组) 、缺血再灌注加项针治疗组( 以下简称项针组) 。其中32 只用于第 1d 和第 14d 脑梗死体积测定（n=4 ）；其余 64 只各组大鼠随机分成 1d、3d、7d、14d 四个时间点，每个时间点 4 只动物，用于免疫组化测定。应用线栓法（改良的 Zea Longa 法）[1]经右侧颈内动脉插线建立大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型。 1.2 动物纳入实验标准 术后大鼠清醒，可以观察到大鼠出现下列偏瘫症状：(1) 大鼠向左做转圈运动；(2)左侧前爪不能伸