栀子多糖中蛋白质的含量测定及除蛋白效果比较.pdfVIP

江西中医药2011年 l2月第 12期总42卷第348期 邑及除蛋白效果比较 的效果。方法：采用考马斯亮兰法测定蛋 白质的含量。 19．92 gm·LI1线性关系良好，方法精密度、重复性、加样 殇。三氯乙酸法除蛋 白的效果最好，除蛋 白后，栀子多糖 性好，可作为 中药栀子多糖中蛋白质的含量测定的方法， t据 。 方法与结果 1 栀子多糖提取 下取，用栀8子52％．0乙K醇g5，粉L碎，在提，过取60罐目中筛浸，在提835次℃，每的温次_ 取2．5小时，过滤，回收乙醇提取液，脱脂栀子晾 器 至无醇味，再用水煎煮法提取3次，每次浸渍4小 ，用8L的水在85％提取2．5小时，过滤，合并滤 减压浓缩后加入一定体积的95％乙醇，使含醇量 到80％，静置过夜。沉淀分别用乙醇、乙醚、丙酮 l 海 幺 汾 三『 千 幄 垦垢 千 幺 粘 制小鼠腹水肝癌细胞和 S一180肉瘤细胞的生长的 2．2 溶液 的配制 功效。栀子多糖成为现代研究的又一热点。本实验 2．2．1 考马斯亮蓝溶液配制 精密称取99．98 采用考马斯亮兰法测定栀子多糖中蛋 白质的含量， mg考马斯亮兰(G一250)于 1000mL容量瓶，然后 并比较不同除蛋 白质的方法的效果，为提供高纯度 加90％乙醇50．0mL超声溶解 ，后再加入85％的磷 的栀子多糖提供理论依据。 酸 100．0mL，最后加蒸馏水至刻度，4℃保存备用。 1 实验材料和仪器 2．2．2 苯酚溶液的配制 j： 取苯酚200g，加铝片 仪器、材料和试剂选用 uV一2550紫外～可见 0．2g和碳酸氢钠0．1g常压蒸馏，收集 182℃馏分， 分光光度计 (日本岛津公司)；BT25S分析天平 (北 称取此馏分 1O．0g，加水使溶解，置 250mL棕色容 京赛多利斯仪器系统有限公司)；牛血清蛋白(进 口 量瓶内稀释至刻度，即得浓度为4％的苯酚溶液，4 分包装，北京索莱宝科技有限公司)；考马斯亮兰(G ℃保存备用。 一 250)(进 口分包装，北京索莱宝科技有限公司)； 2．3 栀子多糖 中蛋 白质含量测定 其它试剂均为分析纯。 2．3．1 供试品的配制 精密称取栀子多糖4．8512 加水量、微波功率、提取时间等影响因素，确定了最 [3]黄 献．鳖甲的研究进展 [J]．海峡药学，2007，19(8)：9． 佳微波辅助提取工艺。与传统水煎煮工艺相比，该 [4]刘强，喻毅，吕志平．鳖甲的提取工艺研究[J]．中成药，2005，27 (11)：1342—1343． 工艺稳定、提取效率高、提取时间短、能耗较少等优 [5]国家药典委员会．中国