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利用pSOS系统筛选靶向HBV病毒X基因的siRNA.pdf

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利用pSOS系统筛选靶向HBV病毒X基因的siRNA.pdf

生物技术通报 BloTECHNOLOGY ·研究报告· BULLETlN 2010年第11期 韦德芳1 高健1 曾春华2 彭明利2 任红2 (1重庆医科大学附属第二医院消化科,重庆400010: (2重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆400010) 摘 要: X-siRNA;pSOS—X·siRNA经Pac time PCR检测胞内HBs HepG2.2.15细胞上清HBsAg、HBeAg表达,Westernblotting检测胞内蛋白HBsAg、HBcAg表达,Real mRNA、HBxmRNA的转录。转染4 效果最强。siRNA4使HepG2.2.15细胞转染后4 HBeAg为(21.69 mRNA和HBx 10± 0.028,均为各处理组中最低(P0.01),HBs X基 因的siRNA靶点。 关键词:pSOS乙肝病毒x基因 RNA干扰 SelectionandValidationof siRNA Sitesfor OptimalTarget BVirusXGenemRNA Vector Hepatitis bypSOS System Wei GaoJianl Chunhua2 Ren Defan91 Zeng PengMingli2 Hon92 Second (1DepartmentofGastroenterology,theAffiliatedHospital,Chongqing400010;2KeyLaboratoryofMolecularBiologyofInfectious Viral 400010) Disease,InstituteforHepatitis,ChongqingUniversityofMedicalSciences,Chongqing was for toconstructthe vector and B Abstract:Thestudy eukaryotieexpressionpSOS-X·-siRNApSOS··siRNAtargetingHepatitis and intothe carcinomacelllines and virus(HBV)Xgene.AftertransfectingpSOS·X·siRNApSOS-siRNAhepatocellular HepG2 HBx canscreenandvalidatethe short RNAs.To and the

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