SOD及其电子迁移促进剂L-半胱氨酸的Raman光谱.pdf

第21卷，第4期 光谱学与光谱分析 vd．21，N。．4，pp485．488 ：22：芏§星 盥警誉譬2Z型§盥：：丝．垒：§虹鎏盆翟譬；罂： soD及其电子迁移促进剂L．半胱氨酸的Raman光谱‘ 曹晓卫 孟晓云 杨海峰 吴霞琴 王桂华 章宗穰 上海师范大学化学系，200234上海 摘要在以电化学方法证实了L．半胱氨酸对铜锌．超氧化物歧化酶在金丝电极上的电子传递过程起有效 促进作用的基础上，应用共焦显微激光拉曼光谱测试技术对固体的L半胱氨酸和铜锌一超氧化物歧化酶进 行了铡定和光谱分析。并对以电化学和浸渍两种不同方法修饰在金电极上的L半胱氨酸，也作了相应的拉 曼光谱测试研究。 主■词拉曼光谱， L半胱氨酸， 铜锌一超氧化物歧化酶， 修饰电极 引 言 2实验部分 作为古铜和锌的生物活性酵，铜锌超氧化物歧化酶 2．1试剂 di锄uta赞，s∞)其作用在于通过L半胱氨酸的盐酸盐由上海丽珠东风生物技术有限公司 (c亡仰盯，zincg平-erc*m 000 处于活性位的铜离子的交替氧化和还原作用，催化快速的两 生产；牛红细胞s0D由华东理工大学制备，比活为6 步歧化反应以便将有毒害作用的超氧阴离子(cE)转变成u·玎塔一。其余的试剂均为分析纯。 为分子氯及过氯化氢’1“。有关S。D在抵御疾病、预肪衰老 2．2仪■ 法国Dilor公司Sup日bb蛳型共焦显微激光拉曼系统。 等方面的应用研究已广泛开展”j，但是相关的应用基础理论 该系统配有共焦显微镜，双光栅1800和600的光谱仪， 研究工作尚有待进一步地深人。 1024×256液氮冷却型e∞检测器，H}Ne气体激光器 由于80D在一般的电极表面的电子迁移过程速度慢、 (激发波长：632．8nm)。该系统的分辨率为2cfn～。 可逆性差，难以用一般的电化学方法研究其电化学行为。有 2．3 I，半胱氯t修饰在盒电极上的实验方法 关应用电化学方法研究s。D在不同电极表面电子传递过程 (1)以电化学扫描方法修饰时，首先，对金丝电极进行 的报道尚不多见”咱J。吴霞琴等曾经用循环伏安法研究了 打音、超声清洗和干燥等预处理。而后，将该电极在2 S。D在薄层电池金微网播电极上的电化学行为。结果表明 Tnmol-dmq的L半胱氨酸溶液中(古0．1nd·出n。的 S。D在薄层电池的金微网栅电极上的电子迁移反应是一准 Nac吼)作为支持电解质，以K2}哟．+K马P0l缓冲组份 可逆过程”』。近期，我们通过一系列研究工作发现，将L 控制溶液pH=7，进行电化学扫描处理，循环扫描10圈， 半胱氨酸作为90D电子迁移的促进剂修饰在普通的金丝电 时间约为20分钟。之后，取出加以淋洗、干燥；而后对其 极上后得到的功能性电极，能够对90D的电子迁移过程起 进行拉曼光谱测试。 到显著的促进作用。 (2)在采用浸渍方法修饰时，为了消除时问因素的影 为了能从分子水平上深入揭示SOD在L半胱氨酸所修响，将经过如上预处理后的金丝电极浸渍在相同组成的L 饰的金电极上的电化学过程的微观本质。有必要借助于拉曼 半胱氨酸溶液中进行惨饰，浸浈时间也控制为20分钟。之 光谱