加压毛细管电色谱法测定五种植物激素.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 P-C038 加压毛细管电色谱法测定五种植物激素· 卢巧梅，卢明华，童萍，陈国南，张兰” (食品安全分析与检测技术教育部重点实验室，福州大学，福州350002) 摘要：采用加压毛细管电色谱法(pCEC)，实现了吲哚乙酸、吲哚丙酸、萘乙酸、6．糠基腺嘌呤和6．苄 基腺嘌呤等五种常见的植物激素的快速分离检测。在最佳电色谱条件下，五种物质在10min内实现快 行加标回收率实验，平均回收率在81．0．94．0％范围间，结果令人满意。 关键词：毛细管电色谱，植物激素，紫外检测，拟南芥 1 引言 。 毛细管电色谱(capillary 色谱(HPLC)的高选择性的优点，具有高效、快速、微量的特点，已经成为备受分析工作者青睐的分 很好地抑制气泡形成，克服了CEC柱内易产生气泡，导致电流不稳的缺点，大大提高了实验的重现性 法有电泳法[2】、气相色谱．质谱联用法【3】、液相色谱．质谱联用法【4】等。CEC测定植物激素【5】的报道很 少，未见pCEC同时检测生长素和细胞分裂素的报道。通过考察流动相组成和比例、缓冲液浓度及pH、 流速、分离电压、检测波长等因素对信号强度和分离效果的影响，建立加压电色谱．紫外检淤J(pCEC．UV) 同时分析五种植物激素的新方法。 2实验部分 2．1仪器与试剂 学试剂公司(上海，中国)。其它试剂均为分析纯。 2．2前处理方法 mL 80％冷甲醇高速匀浆。 在文献[4】的方法上加以改进。准确称取0．59拟南芥叶片剪碎，加入5 过滤，残渣再用冷甲醇抽提两次，合并滤液。固相萃取小柱ODS-C18分别用1mL纯甲醇和lmL甲 醇．水．乙酸乙酯(10：89：l，v，v～)活化。将滤液通过SPE小柱，用1mL甲醇．水．乙酸乙酯(10：89：1，v／v／v) 淋洗，再用lmL甲醇．水．乙酸乙酯(80：19：l，v／v／v)洗脱。收集洗脱液，氮吹。残渣用1mL甲醇再 溶解，过滤后进行CEC分析。 3结果与讨论 3．1最佳电色谱分离条件 mLrain1，工 4．0)．50％7,腈为流动相，等度洗脱，控制流速为0．035 以50％Nail2P04(10raM，pH 作电压．10 kV，检测波长为222nm，柱上检测，初次进样体积为50此，以后每次进样大约为4．5止，。 在最佳CEC条件下5种植物激素在10min内实现完全分离。 3．2检测限和回收率实验 mL1范围内成良好的线 在最佳检测条件下对五种植物激素进行回归分析，五种物质在1．0．100p．g (Fig．1)。通过样品前处理，拟南芥基质并不干扰实际样品分析测定。且加标回收率在81．0％．94．0％之间， 方法的RSDs低于7．1％。 省新世纪优秀人才大学计划(HX2006．101)资助。 ”通讯联系人：张兰，教授，博士生导师，zlan@fzu．cdu．cn 791 一 笙±主星全旦鱼遭堂查垫鱼全丛垡墨垦堕全全达鲨壅釜 广—————．r————-广————r__———T——一． 0．0 2．5 5．0 7．5 10．0豫in with10 mL。’standard ofblank thaliana Pg elcctrochromatogramArabido