一株蜡样芽孢杆菌对麦麸降解作用的研究.pdfVIP

第27卷第3期 黑龙江大学自然科学学报 VoL27No．3 OFNATURALSCIENCEOF UNIVERSnY 2010年6月 JOURNAL HEILONGJIANG June，2010 一株蜡样芽孢杆菌对麦麸降解作用的研究 燕红1， 杨谦2 (1．哈尔滨理工大学化学与环境工程学院，哈尔滨150040，2．哈尔滨工业大学生命科学与工程系，哈尔滨150001) 摘要：通过测定发酵过程中发酵液的纤维素酶、半纤维素酶活、可溶性总糖和还原糖浓度以 及底物残渣重、残渣结晶度、傅立叶红外光谱和表面结构的变化来研究蜡样芽孢杆茵(Bacillussp． X10—1—2)对麦麸的降解作用。结果发现：茵体产酶的同时进行木质纤维素的降解和糖化，发酵 h和48 液中纤维素酶和半纤维素酶的活性分别于菌株培养到第12 h达到最大，总糖和还原糖含量 分别于4h和12h达到最高值，降解5d后麦麸的结晶度未发生明显变化。通过分析底物残渣的 傅立叶红外光谱可知，此菌株对麦麸的降解以半纤维素为主。麦麸中木质纤维素的各主要成分纤 维素、半纤维素和木质素的降解率分别为2．72％、25．6l％和1．09％。利用扫描电镜观察麦麸降 解5d后的残渣，可观察到，Bacillussp．XlO—l一2主要降解了底物内表面蜂巢结构的边缘骨架。 关键词：蜡样芽孢杆菌；麦麸；纤维素酶；降解 中图分类号：093—3 文献标志码：A 0 引 言 纤维素是地球上数量最大的可再生资源，微生物对它的降解、转化是碳素循环的主要环节。它的有效利 用对于解决目前面临的环境和能源危机具有重大的现实意义。因此，要想有效利用这部分资源，就要弄清其 降解特性和机理。以往的研究报道大多使用某一纯化的酶组分对纯的纤维素底物进行研究。由于植物细胞 壁中的纤维素一般是与半纤维素、木质素和其他聚合物伴生在一起…，因此，这些研究的结果可能对植物存 在限制。基于这样的考虑，仅有少量的报道是研究一些纤维素酶直接作用于植物细胞壤嵋。J，但这些研究结 果所提供的信息是不足以全面掌握木质纤维素的降解机理的。另外，所应用的酶组分的来源也多集中于真 菌的一些菌株，而来自于原核生物的纤维素酶的特性以及降解机制都将与来自真菌的酶有很大的区别。原 核生物的纤维素降解机制的研究一直落后于真核，￡物，且不同种属，甚至同一种属不同菌株之间的差异也较 大，导致始终未见有效的降解机制的全面阐释。目前更是未见有关芽孢杆菌对木质纤维素的降解从产酶、产 糖和残渣多方面进行全面分析的研究报道。本文利用一株蜡样芽胞杆菌(Bacilluscereus)对天然木质纤维素 麦麸进行发酵降解，在发酵降解的过程中，定时取样测定发酵上清液中的纤维素酶活、半纤维素酶活、可溶性 总糖、可溶性还原糖浓度的变化以及发酵残渣的结晶度、红外光谱和表面结构的变化，并同时计算木质纤维 素底物中纤维素、半纤维素和木质素各成分的降解率。通过研究，对底物的降解情况有一个全面的了解，为 揭示该菌株的纤维素降解机理提供一些详尽的实验证据，也为纤维素酶的降解机理提供芽胞杆菌(Bacillus sp．)方面的佐证，以及为提出相应的降解机理奠定基础。 1 材料与方法 1．1材料 菌株：由本实验室前期分离筛选并进行鉴定的蜡样芽孢杆菌(Bacillus sp．XIO一1-2)。 仪器和设备：空气浴振荡培养箱、752紫外一可见分光光度计、恒温培养箱、水浴锅、x一射线衍射仪、红 收稿日期：2009—09—20 基金项目：黑龙江省教育厅科学技术面上项目；黑龙江省博士后基金资助项目(LBH—Z07014) 万方数据 ·392· 黑龙江 大学 自 然科学 学报 第27卷 外光谱仪、扫描电子显微镜等。 1．2培养基及培养条件 1．2．1斜面培养基 牛肉膏一蛋白胨培养基。 1．2．2摇瓶发酵培养