3株木霉鉴定和生物学特性及对华山松疱锈防治及研究.pdfVIP

armandii 摘要：华山松(Pinus Franch)是我国的特有树种，也是我国西部中山至亚 高山地区以及长江中上游防护林体系的重要造林树种之一，近十余年因疱锈病危害， 材积生长下降、木材力学性质发生劣变降低其工艺价值。病原茶蔗生柱锈菌 (CronartiumribicolaJ．CFischer)所具有的复杂的生活史和转主寄主的大量存在， 给防治工作造成了极大的困难，从拮抗菌、重寄生菌以及促生菌中开发生防杀菌剂是 生物防治研究的热点话题。‘洱源枝顶孢侵染华山松疱锈菌机理研究》课题组在过去 的研究中筛选出了3株对华山松疱锈病原菌具有强烈破坏作用的木霉菌，并证实它们 能通过产生细胞壁降解酶——几丁质酶和B．1，3．葡聚糖酶来破坏锈孢子。 进行了生物学特性和粗酶酶学基本性质的研究，并对其中2株木霉(TRl和1rI匕)对 华山松疱锈病感病植株的控制效果进行了室内外初步研究，为利用其作为生防菌剂推 广应用于实践生产提供理论依据。本设计的主要研究结果如下： v／r／dePets懿 P．Karsten。rR2和TR3的培养性状与显微特征极为相似，为绿色木霉Z 并且和zv／r／de的ITS序列具有1000％的同源性。TRl和z 100％的同源性。形态特征和分子水平鉴定结果一致：TRl为Z 为Zviride。 山松树皮浸汁和锈孢予培养基上均能萌发，以TRl在各种培养基上的萌发率最高， 萌发速度最快；TR2和TR3在水琼脂和葡萄糖培养基上的萌发较差。3个菌株孢子萌 r／min： 麦粉、黄豆粉、KH2P04；最适pH值和摇床速度相同，分别为pH6．0和120 TRI在温度25℃～30℃，水势．2．32Mpa，接种量5％时菌丝生长量最大。TR2在温 度20(2～25℃，水势为．4．54Mpa，接种量为5％～9％的条件下菌丝生长最好；光照 能明显刺激TRl和TR2分生孢子的产生，尤以对TR2的作用最为明显。 酷绿木霉(TRl)作为重寄生菌、生防菌为国内外首次报道，对其生物学特性的 研究也属首次。 (3)酶学基本性质：2株菌所产B．1，3．葡聚糖酶最适温度均为35℃，45℃以下范 酸碱稳定范围分别为pH3．O～6．0和pH 范围内酶均具较高活性，最适温度范围较宽；此外，n匕所产几丁质酶的热稳定性高 为6．0和5．0。Km分别为92．49斗g／nd和71．II 的抑制作用最强。 (4)不同接种体对华山松疱锈感病枝干的室内控制：2株菌的分生孢子和菌丝 段均能在华山松感病部位的锈子器上定殖和生长，引起锈孢子壁或疣突脱落，锈孢子 死亡；糨酶液处理后同样使锈孢子壁或疣突脱落而死亡，3种接种体的处理结果相同， 说明这2株生防木霉主要是通过细胞壁降解酶破坏锈孢子的。3种接种体对华山松疱 锈均具控制作用。 (5)病株防治范围的确定：通过组织切片从两种不同染色方法中筛选出了较易检 查锈菌菌丝和吸器的染色方法并采用此法检测出茶蔗生柱锈菌集中分布在罹病植株 cm、 干、枝的皮部，枝梢及针叶组织未见菌丝和吸器出现，分布范围为病斑及其以上20 以下15cm范围内。 (6)利用TRI、TR2活菌体对感病华山松植株的野外控制试验说明，木霉能够定 殖在华山松疱锈病罹病植株的病部锈子器上。在经这2株重寄生菌防治的样地中，处 理后的发病株均少于处理前，TRI在出性子器阶段防治一次的平均防效为53．7％。用 TR2连续防治2年的防效最好可达100％，其中位于山腰样地的平均防效为99．1％， 而沟边发病较重的各样地内平均防效也达91．5％。这说明TRI和TR2都是；精潜力 的生防菌株。 关键词：重寄生木霉，分类鉴定，生物学特性，细胞壁降解酶，生物防治试验 Ⅱ armandiiFrench of Abstract：Pimm is狮a垴cInic China．Itisoneofthemain speci