多羟基化合硅胶基质材料在毛细管电泳和亲水色谱中的应用.pdf

摘 要 分子等样品进行高效分离分析的关键步骤，改性在HPCE和HPLC研究中占有举足轻重 的地位。本文采用多羟基化合物7-GPS和6．葡萄糖酸内酯对硅胶基质毛细管和微球进行 化学改性，并研究了改性材料在HPCE和HPLC分离中的应用，取得了如下成果： 一、按照文献方法，采用7-GPS对毛细管进行化学键合改性，考察了改性毛细管柱 的电渗流、对碱性蛋白质的分离效果及柱的稳定性。实验发现，该改性方法对3种碱性 偏差(R．S．D)分别为2．7％和4．6％，蛋白回收率在90．4％．94．7％之间。 二、首次将6一葡萄糖酸内酯共价键合在氨丙基三乙氧基硅烷修饰的毛细管柱内表 面，制备了亲水刷型毛细管。实验发现，该改性毛细管在pH值2．0．9．0的范围内可以产 生稳定的电渗流(EOF)，并能有效地抑制对蛋白质的吸附。用毛细管电泳在分离碱性 蛋白质、DNA和胰蛋白酶水解的牛血清白蛋白(BSA)等生物大分子混合物时，可以 白质保留时间平均相对标准偏差(R．S．D)分别为O．8％和1．4％，重现性较为理想。 三、将6．葡萄糖酸内酯键合在硅胶表面，制备了新型亲水色谱固定相，并以亲水作 用色谱模式对6种强极性的中药组分进行分离，考察不同流动相组成、盐浓度、pH值 以及温度对溶质保留行为的影响。结果发现，新型色谱柱对6种强亲水性中药组分按照 亲水色谱模式进行了较好分离，应用于丹参素注射液的分离中，也取得了较为满意的效 果。 关键词：高效毛细管电泳，亲水作用色谱，6．葡萄糖酸内酯，生物大分子， i 强极性化合物 Abstract Themodificationofsilica-basedmaterialWasaviml intheefficient and step separation andHPLC．Andtherefore adecisive of HPCE analysisbiological occupied samplesby intheresearchof Performance High position High Capillary Performance silica-basedand Chromatography(HPLC)．Thecapillarymicro-sphere Liquid weremodifiedthe and by multi-hydroxylcompounds inHPECandHPLCwere inthisthesis．The 5-Gluconolactone，their application investigated obtainedresultswereasfollows： theinnersurface 1．The was onto capillarypreparedbycovalentlybonding7-GPS the to literaturemethod．Theelectroosmotic according flow(EOF)、basic