hplcf分析物样品中氟乙酸类毒物成分的研究.pdfVIP

中文摘要 中山大学博士论文 HPLC／FD分析生物样品中氟乙酸类毒物成分的研究 专业： 有机化学 作者： 谢珍茗 导师： 邓芹英教授 (中山大学化学与化学工程学院，广州，510275) 摘 要 氟乙酸类药物包括氟乙酸钠、氟乙酸和氟乙酰胺，在我国是使用最广泛的 化学类灭鼠药物之一。由于其无色无味，使其成为容易引起人和动物误食中毒 和被犯罪分子进行投毒犯罪的毒物。因此开展氟乙酸类毒物的分析，特别是生 物样品中痕量氟乙酸类毒药的分析方法研究是具有重要学术价值和社会效益的 研究工作。 针对我国氟乙酸类毒药分析存在的问题，本论文在广东省科技计划项目基 金和广东省公安厅科研基金的资助下，进行了高效液相色谱(ItPLC)一荧光检测 研究，取得良好的结果。主要内容如下： 第一章：综述了氟乙酸类毒物的理化性质和国内外有关氟乙酸类毒物的提 取、分离及分析测定方法的研究概况，评价了各种方法的优缺点和对样品的适 用性。概述了荧光检测在高效液相色谱中的应用，荧光试剂和荧光衍生的方法。 第二章：研究并建立了以9一氯甲基蒽为荧光衍生化试剂，高效液相色谱一 荧光检测法测定生物检材中的氟乙酸钠含量的方法。首次合成并表征了氟乙酸 9一亚甲基葸酯衍生物(文献未见此化合物的报道)，测定了其物理常数、波谱数 据及荧光性质。较深入地研究和优化了生物样品中氟乙酸钠的提取、纯化、衍 生化的方法。结果表明，用反相HPLC-FD测定生物检材中氟乙酸钠含量，在所 用的色谱分离条件下，目标分析物与反应试剂及其他杂质达到完全分离，氟乙 酸9一亚甲基蒽酯具有强的荧光活性，方法的灵敏度高(检测限5x10。39)，重现 性好(回收率为82％一92％)，用于实际样品的分析，取得令人满意的效果。 中山大学博士论文HPLC／FD分析生物样品中氟乙酸类毒物成分的研究谢珍茗 第三章：建立了荧光试剂4一溴甲基一7一甲氧基香豆素(BrMMC)用于生物检 材中氟乙酸钠的高效液相色谱分析。首次合成了4一氟乙酸一7一甲氧基香豆素甲 酯(MMC—MFA)，并进行了物理性质，结构表征和光谱性质等研究。通过对衍生 化条件和色谱分离条件的优化，建立了理想的氟乙酸钠的柱前衍生化高效液相 色谱荧光检测法。结果表明，4一氟乙酸一7一甲氧基香豆素甲酯具有较强的荧光活 性，在反相HPLC分析中，可与小分子有机酸(甲酸、乙酸、丙酸等)的衍生 物、剩余的衍生化试剂及其水解产物完全分离。方法专属性强、灵敏度高(检测 限为50Pg)，回收率为81％--88％，适用于实际检材样品的分析。 第四章：研究选用a一溴苯乙酮为氟乙酸钠的衍生化试剂，合成了a一氟乙 NMR、”C 酸苯乙酮酯化合物对照品，产物纯度高，用UV、1H NMR和EI—MS表 征了该衍生物的结构，研究并建立了生物检材中氟乙酸钠的提取、衍生化和高 效液相色谱紫外检测方法。结果表明，Ⅱ一溴苯乙酮和氟乙酸钠的反应条件较温 和，速度快，是一种理想的柱前衍生化试剂。HPLC分离结果表明，建立的柱前 衍生化高效液相色谱紫外检测方法适用于氟乙酸钠浓度较高的生物检材测定。 平均回收率为91．33％，最低检出浓度为6xlO—mol·mLl 第五章：把建立的荧光柱前衍生化HPLC测定方法扩展到其他有机酸含量的 测定，采用高灵敏的荧光试剂9一氯甲基蒽(CMA)作为柱前衍生化试剂，在反 相高效液相色谱上，实现了6种游离有机酸衍生物的完全基线分离。方法衍生 产率高、条件温和、操作简便。具有较好的重现性，灵敏度高，对土壤与食品 中的游离有机酸实现了快速、准确的测定。 第六章：分别对9一氯甲基葸，4一溴甲基一7一甲氧基香豆素和旺一溴苯乙酮 三种衍生化试剂用于生物检材中氟乙酸钠含量的液相色谱分析方法进行总结， 对三种HPLC分析方法的分离条件和检测结果对比，结果表明，9一氯甲基葸衍 生化HPLC检测具有最高的检测灵敏度，Ⅱ一溴苯乙酮法具有较宽的检测范围和 较好的检测重现性。